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小鼠mirna -203慢病毒过表达载体的构建及病毒包装与滴度测定（论文）
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小鼠miRNA-203慢病毒过表达载体的构建及病毒包装与滴度测定
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&&目​的​构​建​m​i​c​r​o​R​N​A​-0(​m​i​R​-0)​过​表​达​慢​病​毒​载​体​,​并​对​其​进​行​病​毒​包​装​、​鉴​定​与​滴​度​测​定​。​方​法​利​用​化​学​合​成​m​i​R​-0发​夹​前​体​结​构​R​N​A​(​s​m​a​l​l​ ​h​a​i​r​p​i​n​ ​R​N​A​s​,​h​R​N​A​)​,​并​将​其​克​隆​入​p​S​i​c​o​R​质​粒​中​,​经​双​酶​切​及​测​序​鉴​定​;​利​用​脂​质​体​将​鉴​定​的​阳​性​重​组​p​S​i​c​o​R​-​m​i​R​-0表​达​载​体​、​p​C​M​V​-​V​S​V​-​G​和​p​C​M​V​-​d​R.1​三​个​质​粒​共​转​染​到​H​E​K​-9T​细​胞​,​分​别​在8​h​和2​h​收​获​上​清​,​包​装​产​生​慢​病​毒​。​将​所​得​病​毒​悬​液​梯
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