荧光pcr的ct值大于多少可以认为是pcr只有引物二聚体体

  PCRqPCRRNART-qPCR
PCRCtCqqPCRCt
PCRDNASYBR& GreenPromegaBRYT& GreenDNAROX
Surekha Karudapuram
master mixBrilliant III Ultra-Fast SYBR& Green QPCR & QRT-PCR master mixesBio-RadSsoAdvanced™ SYBR& Green SupermixLife TechnologiesPromegaQiagenType-it CNV SYBR Green PCR KitsFastStart SYBR Green MasterSigma-AldrichKiCqStart& SYBR& Green qPCR ReadyMix™ThermoLuminaris Color HiGreen High ROX qPCR Master Mix
qPCRLife TechnologiesTaqMan&5’3’5’-3’
master mixesBrilliant III Ultra-Fast QPCR & QRT-PCR Master MixesBio-RadSsoFast Probes SupermixLife TechnologiesTaqMan Fast Advanced Master MixPromegaGoTaq Probe qPCR Master MixQiagenType-it CNV Probe PCR +qC KitFastStart TaqMan Probe MasterThermoDyNAmo ColorFlash Probe qPCR Kit
SYBR GreenTaqManqPCR80-90%Scorpion&
DNATaqManScorpionPCRPCR
PromegaPlexor& qPCRPlexoriso-dCDNADNAqPCRPlexorPromegaGabriela Saldanha
SaldanhaPlexorPlexor
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PCR跑出来的条带是这个样的,会不会是引物二聚体啊?
第一次P 跑的奇奇怪怪啊
我的DNA浓度不高,引物是515F和806R。
跑的条带是歪的,关键是对照也跑出条带了。
跪求各路大神指点啊。
QQ图片33.jpg
你ta克隆做了没?我可能是DNA浓度太低了,你是什么原因导致的?
为什么要酶切测序?连在T载上面,直接用M13通用引物测序就好了啊。
我也是新手,不太懂。我们实验室测序之前都会跑PCR鉴定、酶切鉴定。心里有数。
嗯,谢谢!
我用的qPCR引物,目的片段105bp,很容易和引物二聚体混在一起。TA克隆不用设计带酶切位点的引物。
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扫描下载送金币请教 做染料法荧光定量PCR,熔解曲线分析,如何区分目的基因产物和引物二聚体呢?是不是一般峰比较高的那个就是目的基因产物了?_百度作业帮
请教 做染料法荧光定量PCR,熔解曲线分析,如何区分目的基因产物和引物二聚体呢?是不是一般峰比较高的那个就是目的基因产物了?
你要重新设计引物了 有引物2具体有好几个峰,谁也不知道是哪个,是产物的话主要看溶解温度,溶解温度高一般是产物.建议重新设计引物,重做梯度PRC 电泳分析.
懒得做电泳了,引物是没有问题的,因为是参考文献上的
其他类似问题
二聚体不会出现指数增长期吧 设定阈值的时候把下面的滤掉就可以了
单峰说明产物单一
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