293t细胞培养包病毒时细胞密度要多高

293T细胞是怎么包装病毒的我是新手,来实验室听师兄说将要过量表达的基因转入293T细胞,可以通过293T细胞包装病毒来收集,我想问下293T细胞是怎样将目的基因包装成病毒的
天堂念影の顈滀
慢病毒包装简要程序(以六孔板中的1孔为例):第一天:1.用无抗生素DMEM+10%FBS铺板293FT细胞,2ml/孔.确保第二天细胞密度达到80%-90%融合度第二天:\x09\x09\x091.转染293FT细胞.1.500ul Opti-MEM稀释2ug pWPXLd-目的基因+1.5ug psPAX2+1.5ug pMD2.G 2.500ul Opti-MEM稀释15ul lipofectamine20003.5min后,将,溶液混合,室温静止30min\x094.从6孔板中吸出1ml培养基,然后滴加入1ml质粒和脂质体混合物.2.6-10h后,移除含有DNA-脂质体复合物的培养基,代之以正常培养液DMED+ 10%FBS(从此刻开始算时间).第三天:3.转染24h后,荧光显微镜下观察,转染效率应达到70%以上第四天:4.48h收获含病毒的上清,0.45um滤膜过滤,同时再往6孔板中加入2ml完全培养基4.感染细胞:用一份病毒液+2份完全培养基感染目的细胞.第五天:5.72h后再次收获病毒上清.将昨天感染的细胞离心去除上清,然后再次感染目的细胞.6.一般感染48h后,就能见到明显的荧光.说句实话我是复制过来的,希望可以帮你.
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慢病毒转染
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你可能喜欢我看有的文献上说用293A细胞包装腺病毒 而后感染的是293T细胞,请问为什么?_百度知道
我看有的文献上说用293A细胞包装腺病毒 而后感染的是293T细胞,请问为什么?
提问者采纳
首先你提的问题就问的不明白,为什么后感染的是293T细胞呢?你到底想问什么呢?
我看到的一篇文献,病毒包装时用293A,而后感染293T细胞,一方面是病毒的扩繁,一方面 检测是否表达蛋白。。。。。。
你有什么疑虑?文献用293A包装,然后他检测用293T这样不行么?
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