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血涂片_百度百科
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血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法,应用极广。特别是对各种血液病的诊断有很大价值。但血片制备和染色不良,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论。例如,血膜过厚细胞重叠缩小,血膜太薄多集中于边缘;染色良好的血片是血液学检查主要基本技术之一。
血涂片血涂片-方法
1. 是由酸性染料伊红和碱性染料组成的复合染料。
美蓝(又名亚甲蓝mehyleneblue)为四甲基染料,有
对醌型和邻醌型两种结构,通常为氯盐,即氯化美蓝,美蓝容易氧化为一,二,三甲基硫堇等次级染料(即天青)市售美蓝中部份已被氧化为天青.伊红(又名曙红cosin)通常为钠盐即伊红化钠。和伊红水溶液混合后产生一种憎液性胶体伊红化美蓝中性沉淀,即。瑞氏染料溶于甲醇后,又重新解离为带正电的美蓝和带负电的伊红离子。2.细胞的染色既有物理的吸附作用又有化学的亲和作用.各种细胞和细胞的各种成份化学性质不同对各种染色料的亲和力也不一样.因此用染色液染色后在同一血片上可以看到各种不同的色彩,例如血红蛋白颗粒为与酸性染料伊红结合染粉红色称为酸性物质,细胞核蛋白和淋巴细胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染蓝色或紫色称为嗜,中性颗粒成等电状态与伊红和美蓝均可结合,染紫红色称中性物质.
血涂片血涂片-实验材料、试剂
3.1实验材料:医用采血针、棉球、、血推片、消毒牙签
3.2实验试剂:瑞氏染液、抗B血清、抗A血清、生理盐水、
3.3仪器设备:Motic光学显微镜
血涂片血涂片-实验步骤
4.1ABO血型鉴定
4.1.1取一块清洁玻片,用记号笔标上记号。
4.1.2用小滴管吸A型标准血清(抗B)一滴加入左侧,用另一小滴管吸B型标准血清(抗A)一滴加入右侧
4.1.3以穿刺法自左手无名指指尖取血,在玻片的每侧各放入一小滴血,用牙签搅拌,使每侧抗血清和血液混和。每边用一支牙签,切勿混用。
4.1.4静置室温下10—15min后,观察有无凝集现象,并据此判断血型。
4.2血涂片的制作及观察
4.2.1取末捎血一滴置于玻片的一端,左手持,右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴,血滴即沿推片散开。然后便推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动,载片上保留下一薄层血膜
4.2.2血涂片制成后可手持玻片在空气中挥动,使血膜迅速干燥,以免血细胞皱缩.
4.2.3用蜡笔在血膜两侧划线,以防染液溢出,然后将血膜平放在染色架上.加瑞氏染液2-3滴,使覆盖整个血膜,固定0.5-1.0分钟.滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水,与染料混匀染色5-10分钟.
4.2.4用清水冲去染液,待后或用吸水纸吸干,即可置血涂片于显微镜下进行镜检。
4.2.5分类计数。
选择涂片的体尾交界处染色良好的区域,在油镜下计数100个,按其形态特征进行分类计数,求出各类细胞所占比值。
:1g加甲醇(AR)600ML。将瑞氏染料放在清洁干燥乳钵中,加少量甲醇,充分研磨使染料溶解.将已完全溶解的部分倒入棕色试剂瓶中,未溶解部分再加少量甲醇研磨,直至染料完全溶解于甲醇为止。新配制的染料偏碱,须在室温和37℃下一定时间待染料成熟,主要逐渐增多为后才能使用.贮存时间越久染色效果越好,因此,Deamgilliland等采用吸光度比值(rA)作为瑞氏染料的质量规格.rA测定方法如下:取瑞氏染液15-25ul(视染液浓度而定)加甲醇10ml稀释,混匀后以甲醇为空白管分别以波长650nm,525nm比色,rA=A650/A525。
因为美蓝吸收峰为波长650nm,伊红吸收峰波长为525nm,天青B吸收峰也为650nm,但吸光度A约为美蓝的一半.所以新配制染料的RA接近2,随着美蓝逐渐氧化为天青B,RA也相应下降,RA下降达1.3±0.1即可使用.在贮存过程中必须塞严,以防甲醇挥发和氧化为甲酸.有人主张配方中加入30ml甘油,防止甲酸挥发,并可使细胞染色清晰.甲醇必须纯净,如甲醇中丙酮含量过多,染色,使细胞着色不良。(PH6.4-6.8):0.3g加0.2g再加至1000ml,配制成磷酸盐缓冲液调整PH,如无缓冲液可用新鲜蒸馏水代替。
血涂片血涂片-白细胞分类计数正常参考值
细胞类别成人
杆状核0.01-0.05
分叶核0.50-0.70
0.005-0.05
血涂片血涂片-附注
1要避免重复计数,玻片应由血膜边缘向中央依次上下呈曲线移动.
2总数超过20×109/L,应分类计数200个细胞,白细胞数明显减少的血片,可检查多张血片。
血涂片血涂片-注意事项
1) 玻片的清洗:新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24小时,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1小时,然后擦干或烤干备用。使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面;,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。
2) 细胞染色对氢离子浓度十分敏感,在染色过程中玻片必须化学清洁,配制必须用优质甲醇,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则各种细胞染色反应异常,致使细胞的识别困难,甚至造成错误。
3) 一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免和发生退行性变。
4) 血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落,因此血膜必需充分干燥.
5) 染色时间与染液浓度,室温高低,细胞多少有关.染液越淡,室温越低,细胞越多,所需染色时间越长或应适当增加染液量,因此染色时间应视具体情况而定.特别是更换新染料时必须经试染,摸索最佳染色条件.
6) 染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.
7) 冲洗时应用流水将染液冲去.不能先倒掉染液,以免染料沉着于血片上.
8) 染色过深可用甲醇或适当脱色,最好不复染,必须复染时,可将染液先稀释好再复染.
9) 染色时应注意保护血膜尾部细胞,不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.
血涂片血涂片-染色结果
在正常情况下血膜外观为粉红色,在显微镜下呈肉红色;胞浆能显示各种细胞的特有色彩,细胞核染紫红色,染色质清楚,粗细松紧可辨。染色结果偏酸,则红细胞和颗粒偏红,白细胞核呈浅蓝色或不着色;染色结果偏碱,则所有细胞染成灰蓝色,颗粒深暗,嗜酸性颗粒可染成暗褐色,甚至紫黑色或蓝色。嗜中性颗粒偏粗,偏碱(紫黑色).血片原处呈绿色.
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共1条医生回复
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职称:医师
专长:盆腔腹膜炎,细菌性阴道炎,霉菌性外阴炎
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指导意见:你的症状分析属于血尿,一般造成血尿的原因很多,如肾结石,肾炎,生殖泌尿系统的炎症或感染,尿道结石等。建议 最好做尿常规,B超,细菌培养等检查确定病因,确诊后在针对性治疗。
问尿检阴,红细胞各三个加号是什么意思?
职称:医生会员
专长:高血压、糖尿病
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病情分析:三个加是指视野下能看到3个红细胞。1.肾脏及尿路疾病
  (1)炎症:急慢性肾小球肾炎、急慢性肾盂肾炎、急性膀胱炎、尿道炎、泌尿系统结核、泌尿系统霉菌感染等   (2)结石:肾盂、输尿管、膀胱、尿道,任何部位结石,当结石移动时划破尿路上皮,即容易引起血尿亦容易继发感染。大块结石可引起尿路梗阻甚至引起肾功能损害   (3)肿瘤:泌尿系统任何部位的恶性肿瘤或邻近器官的恶性肿瘤侵及泌尿道时均可引起血尿发生 还有就是血液系统疾病。
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问孕妇尿检隐血3+
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专长:擅长消化内科
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病情分析::一般而尿潜血言归因于下列三项原因,一是炎症,一是结石,再则是肿瘤。建议结合孕妇的症状进一步的进行确诊和治疗
意见建议:
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问尿检红白细胞出问题是什么意思啊,一...
职称:主治医师
专长:母婴ABO血型不合
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指导意见:你好,根据你的描述,这种情况一般见于急性肾盂肾炎,希望你积极进行治疗。
问血检、尿检报告:血白细胞偏低 尿红细胞偏低
5--8/HP 血红细胞偏低3.59*1012/L 血..
职称:医师
专长:心血管内科、消化内科、呼吸内科
&&已帮助用户:272877
你好,你的白细胞具体是多少?尿中正常情况下是没有红细胞的,所以谈不上尿红细胞偏低的现象,你的血红细胞问题不大,血红蛋白也没有太大的问题,不会影响生育的。
问尿检上皮细胞+是什么意思
职称:医生会员
专长:擅长消化内科
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病情分析: 你好,上皮细胞是尿路脱落细胞,反映了尿路新陈代谢而比较快
初步建议,多喝白开水,禁食辛辣油腻生冷,定期复查尿常规,希望身体健康。
问尿检白细胞++++是什么意思
专长:器官移植、性功能障碍、心血管外科
&&已帮助用户:220741
尿检白细胞明显增多提示有感染的可能性大比如尿道炎膀胱炎前列腺炎肾盂肾炎等建议检查一下尿细菌培养和B超同时用抗生素治疗比如头孢类抗生素如果能检查出细菌就继续做药敏试验根据药敏试验的结果选择敏感的抗生素治疗
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