FITC Annexin V and PI Apoptosis Kit 细胞凋亡检测试剂盒 - 亚太恒信生物科技（北京）有限公司
抗体标签抗体内参抗体同型对照标记二抗一抗标签抗体单克隆多克隆内参抗体单克隆多克隆同型对照抗人抗小鼠抗大鼠标记二抗抗小鼠抗大鼠抗兔抗山羊抗人其他二抗一抗细胞凋亡细胞周期细胞自噬干细胞抗体甲基化抗体磷酸化抗体乙酰化抗体膜受体抗体泛素化抗体神经科学类固醇抗体亚细胞定位抗体信号转导蛋白结构抗体细胞因子抗体分子生物学核酸操作PCR产品分子克隆分子标准核酸电泳工具酶类miRNA产品慢病毒产品基因组编辑核酸操作质粒提取RNA提取基因组提取纯化回收PCR产品PCR 试剂RT-qPCR其他分子克隆感受态克隆载体克隆试剂盒分子标准DNA MarkerRNA Marker核酸电泳核酸染料其他工具酶类修饰酶蛋白酶内切酶其他miRNA产品miRNA提取miRNA引物miRNA检测mimicsinhibitor靶标克隆前体克隆慢病毒产品慢病毒包装慢病毒纯化慢病毒检测基因组编辑基因敲入基因分型细胞生物学血清培养基添加剂平衡盐转染试剂重组蛋白细胞因子细胞检测细胞治疗血清胎牛血清山羊血清马血清驴血清培养基DMEMRPMI 1640DMEM-F12OPTI-MEMM199IMDM添加剂胰酶抗生素其他平衡盐PBSDPBSHBSSEBSS转染试剂质粒DNA转染siRNA转染体内转染重组蛋白人小鼠大鼠细胞因子生长因子趋化因子炎症因子肥胖因子细胞检测增殖/毒性凋亡/坏死细胞周期细胞治疗支原体检测黑胶虫防治污染清除细胞器探针细胞膜探针细胞核探针细胞质探针线粒体探针溶酶体探针内质网探针肌动蛋白（Actin）探针高尔基体（Golgi）探针蛋白质组学蛋白质检测Elisa试剂盒蛋白芯片夹心法抗体芯片标记法抗体芯片蛋白质检测蛋白提取蛋白定量蛋白电泳蛋白染色蛋白MarkerWB试剂IHC试剂Elisa试剂盒双抗夹心法竞争法EIACell-Based Elisa磷酸化ElisaEispot Kit蛋白芯片Immunome Arrays过敏原芯片细胞因子芯片肿瘤自身抗体片夹心法抗体芯片标记法抗体芯片人标记法抗体芯片小鼠标记法抗体芯片大鼠标记法抗体芯片生化产品生化试剂分析试剂生长调节剂生化试剂抗生素氨基酸染色剂生物碱维生素抗氧化剂糖类酶及辅酶表面活性剂酶检测底物分析试剂标准品色谱试剂其他生长调节剂生长素分裂素脱落酸类茉莉酮酸耗材吸头类离心类PCR类冻存类移液器过滤类防护类研磨类器械类吸头类常规吸头低吸附吸头上样吸头吸头盒离心类离心管离心瓶离心管架PCR类PCR管PCR板封板膜PCR管盒冻存类冻存管冻存盒降温盒移液器单通道8通道12通道分液器过滤类滤器滤膜滤纸细胞筛过滤装置防护类头部眼部口部手部全身研磨类研钵研磨棒匀浆器器械类剪刀镊子脱脂棉纸质类称量纸擦镜纸硫酸纸玻璃纸玻片类载玻片盖玻片粘附玻片色谱类色谱柱萃取柱进样针进样瓶采血类采血针标准管抗凝管促凝管容器类三角瓶试剂瓶试管量器类烧杯量筒量瓶量杯移液类移液管巴氏吸管细菌培养类培养皿其他细胞培养类培养板培养皿培养瓶其他仪器摇床天平离心机光度计显微镜超声系列制冷仪器干燥仪器成像系统摇床水平摇床脱色摇床气浴摇床水浴摇床振荡摇床天平分析天平电子天平精密天平离心机迷你离心机低速高速低速冷冻高速冷冻光度计可见光紫外分光原子吸收分光显微镜体视显微镜普通生物显微镜其他显微镜显微镜配件超声系列超声清洗机超声细胞破醉仪制冷仪器低温冰箱超低温冰箱制冰机程序降温仪液氮罐及配件干燥仪器鼓风干燥箱真空干燥仪冷冻干燥仪气流烘干仪成像系统凝胶成像仪活体成像仪紫外分析仪洁净工作台超净台生物安全柜电化学仪器PH计滴度计浊度计糖度计恒温培养仪器恒温槽浴（水浴锅）二氧化碳培养箱生化培养箱光照培养箱霉菌培养箱人工气候箱消毒灭菌仪器温热/压力干热灭菌仪气体熏蒸灭菌仪电热反应仪器电热套电热板消解仪反应釜/器生化免疫分析酶标仪洗板机生化分析仪血凝分析仪血细胞分析仪组织生物学仪器组织切片生物组织脱水机组织包埋机推片机/烤组织染色机分子生物学仪器PCR仪电泳仪/电泳槽化学发光分析仪杂交仪电转仪细胞生物学仪器细胞分析仪细胞计数仪/器细胞破碎仪细胞融合仪微生物检测仪器接种仪平板分装仪菌落计数仪/器植物生理生态仪器叶面积测定仪叶绿素仪水势仪光合作用测定仪破碎仪/混合仪器匀浆器均质机超声破碎仪搅拌机/器
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FITC Annexin V and PI Apoptosis Kit 细胞凋亡检测试剂盒&
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现货FITC Annexin V and PI Apoptosis Kit (细胞凋亡检测试剂盒) 产品货号组份试剂名称包装储存条件A026组份 AFITC Annexin V500 μl避光 2-6°C组份 BPI200 μl避光 2-6°C组份 C5×Annexin-binding buffer50 ml2-6°C 注：按照推荐的储存条件保存有效期为 1 年，请注意不要冷冻保存。激发/发射波长：FITC：494/518 nm；PI：535/617 nm。实验所需耗材（不包含在试剂盒中）1×PBS（pH 7.2~7.6）去离子水诱导剂18×18 mm 盖玻片注意事项荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。一、试剂盒说明细胞凋亡（apoptosis）指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的 死亡。它是细胞正常生理活动的一部分。在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS） 只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸 （PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为 35~36 kD 的 Ca2+依 赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷 脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此 AnnexinV 被作为检测细胞早期凋 亡的灵敏指标之一。将 Annexin V 进行荧光素（eGFP,FITC,Andy Fluor）或生 物素标记，以标记了的 AnnexinV 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪 可检测细胞凋亡的发生。FITCAnnexinV/PI 细胞凋亡检测试剂盒提供了一种快速、方便分析细胞凋亡的 方法。本试剂盒包括含 FITC 标记的 AnnexinV 用于检测早期凋亡细胞，和即用 型的核酸染料 PI 用于检测晚期凋亡细胞和死细胞。碘化丙啶（PropidiumIodide, PI）是一种红色核酸染料，它不能透过完整的细胞膜，但对凋亡晚期的细胞和死 细胞，PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此，将 Annexin V 与 PI 联合使用 时，就可以将处于不同凋亡时期的细胞和死细胞区分开来。二、 实验步骤样品染色1． a) 悬浮细胞：300×g，4℃离心 5 min 收集细胞。b) 贴壁细胞：用不含 EDTA 的胰酶消化后，300×g，4℃离心 5 min 收集细胞。（注：胰酶消化时间不易过长，否则容易引起假阳性）2． 准备阳性实验对照组，使用合适的方法诱导细胞凋亡。同时准备未经凋亡诱导处理的细胞作为阴性实验对照组。3． 用 4℃预冷的 PBS 洗涤细胞 2 次，每次均需 300×g，4℃离心 5 min4． 配制 1×Annexin-binding buffer：用去离子水按 1:5 稀释 5×Annexin-binding buffer（组份 C）（2ml 5×Annexin-binding buffer +8ml 去离子水）5． 用 1×Annexin-binding buffer 重悬细胞，调节其浓度为~1×106细胞/ml。6． 取 100 μl 细胞悬液于 5 ml 流式管中，加入 5 μl eGFPAnnexin V（组份 A） 和 1~2 μl PI（组份 B），轻轻混匀。7． 室温、避光、反应 15 min。8． 加入 400 μl 1×Annexin-binding buffer，轻柔混匀，冰上放置。9． 请在 1 小时内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。荧光显微镜观察1．用 1×Annexin-binding buffer 洗涤细胞，300×g，4℃离心 5 min。然后用 1×Annexin-binding buffer 重悬细胞。2．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞。3．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡。（1） 将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组。（2） 用 PBS 洗涤细胞两次。（3） 在 100μl1×Annexin-bindingbuffer 中加入 5~25μleGFPAnnexinV， 2 μl Propidium Iodide 混匀。（4） 将上述溶液滴加于盖玻片表面，使盖玻片表面均匀覆盖。（5） 避光、室温反应 5~15 min。（6） 用 1×Annexin-binding buffer 洗涤细胞两次4．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下、双色滤光片（FITC 和罗丹明）观察 eGFPAnnexin V 荧光信号呈绿色，PI 荧光信号呈红色。流式细胞仪分析用流式细胞仪检测，激发波长 Ex=488 发射波长 Em=530 nm。FITC AnnexinV 绿色荧光通过 FITC 通道（FL1）检测；PI 红色荧光通过 PI 通道（FL2 或 FL3）检测。荧光补偿调节：使用未经凋亡诱导处理的正常细胞，作为对照进行荧光补偿调节去除光谱重迭和设定十字门的位置。三、实验案例
使用 10 μM 喜树碱处理 Jurkat 细胞 4 小时作为阳性实验组，同时设置未处理组 做阴性对照。使用FITC AnnexinV/PI 细胞凋亡检测试剂盒的实验操作说明对以上两组细胞进行相应的实验处理，流式细胞仪进行观察。结果显示，阳性实验组（右图）相比对照组（左图） ，获得更高的凋亡细胞数量。A：代表凋亡细胞； V：代表活细胞；N：代表死亡细胞。相关文献1、
&Fangfang Huang, Shasha Zhao, Fangmiao Yu, Zuisu Yang, Guofang Ding
Mar Drugs. 2017 F 15(2): 31. Published online 2017 Feb 14. doi: 10.3390/md PMCID: PMC5334611
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& & & & & & & & &010-订购咨询：技术咨询：& AnnexinV联合PI染色法定量检测凋亡细胞
AnnexinV联合PI染色法定量检测凋亡细胞
摘 要：AnnexinV联合PI染色法定量检测凋亡细胞
【题　名】AnnexinV联合PI染色法定量检测凋亡细胞
【作　者】郑骏年 谢叔良
【机　构】徐州医学院附属医院泌尿研究室
【刊　名】《上海免疫学杂志》 1999年第19卷第1期,31-34页
【关键词】凋亡 流式细胞术 AnnexinV TUNEL PI
【文　摘】AnnexinV联合PI染色法定量检测凋亡细胞
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凋亡,流式细胞术,AnnexinV,TUNEL,PI
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AnnexinV,PI双染凋亡细胞检测protocol
&&annexinV-FITC(FL1 通道)+ PI(FL2通道)双染细胞,FITC阳性+PI阴性细胞百%就是早期凋亡%
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