微生物室的实习小结
　　微生物室的实习小结范文
　　病原微生物感染引起发病，院内感染不断增加。细菌由于人类不断婪用抗菌药物，耐药性不断增加，这些都严重危害人类健康。病原微生物在实验室潜在对实验室人员的威胁也日趋严峻。生物安全的宣教必不可少，怎样把只有基本微生物知识的学生，与临床实验室大量面对病人标本的采集、运送、接种、培养、观察、鉴定、药敏、报告等各个环节的实践结合起来，由基础知识向专业技能有效转化，把基础理论知识在实习中有效发挥，与实践相结合使之升华，是培养合格检验人才的关键。现就微生物室的实习带教体会 总结如下。
　　1、重视标本送检前的质量控制。
　　微生物实验室每天都收到来自病房，门诊病人送检的大量标本，有痰、中段尿、伤口分泌物、生殖道拭子、血培养、脓液、术中临时所采集的标本等等。标本的采集、运输和处理是否得当及时对试验结论有直接影响。是分析前质量控制的重要环节，只有让学生全面认识标本采集与处理的全过程及影响因素，才能确保检验结论的准确性、有效性。
　　1.1标本的采集
　　例如中段尿的采集，应告知学生尿道内是人体无菌的腔道，尿道外则是有菌的部位。所以采集中段尿时必须对外阴进行彻底消毒，排出前一段尿液，以便冲洗外尿道或外阴，留取中段尿于无菌杯中送检。如痰标本的采集，应嘱病人于清晨嗽洗口腔，咳出深部的痰液于无菌杯中送检，如是支原体和衣原体的检测，则应留取女性宫颈拭子或男性尿道拭子，因为支原体和衣原体都只寄生在宫颈或者尿道的柱状上皮细胞内。
　　1.2标本的处理
　　学生应知道，标本的及时处理接种对微生物的成活率至关重要，例如淋病奈瑟氏菌，需要保温，保湿送检，提倡床边接种，培养基应先预温，接种后放36℃温箱、5%co2环境，保湿培养。又如痰标本应接种在血平板，巧克力平板，沙基，嗜血流感巧克力平板上，血平板和巧克力平板主要观察病人痰标本里的基础菌群的生长状态。沙基主要观察是否有念珠菌生长，嗜血流感巧克力平板主要是观察是否有嗜血流感杆菌属的生长，此平板在配制时加入了针对性抗菌药物，能够抑制革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌的生长，只适合于嗜血杆菌属的生长。学生应学会每一份标本，接种到相应有用、有目的、有选择的培养基中。
　　2、注重特征、综合分析
　　细菌的鉴定是运用所学知识，综合性判断的过程。它需要根据病人基本信息，标本来源、诊断、平板上形态特征，生长情况，氧化酶、触酶阴阳性状、革兰氏染色镜下形态，生化反应，药敏结果等进行综合性判断，最终得出鉴定结果。我们在带教过程中应根据以上信息，逐项分析，深入浅出，理论联系实际，把学生在课堂中所学知识调动出来，温故知新，对病人标本的状况加以充分阐述，循序渐进，循循诱导。加深学生在视觉、听觉、嗅觉的印象。例如革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌在血平板，巧克力平板是有区别的。革兰氏阴性杆菌在平板上菌落直径较大，约3-5mm，突起、圆形，湿润、有光泽感，我把它比作面包。革兰氏阳性球菌，在平板以上菌落直径较小，约2-3mm，较前者小、圆形、湿润。有光泽感，但不如前者，贴平板生长，我把它比作饼。一包一饼就简单易记地把革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌区分开来。使细菌菌落生活化，形象化，易于记忆。如铜绿假单胞在平板上菌落边缘不整齐，有绿色素，菌落边缘向外延长，培养时间越长菌落越大，有特殊的芳香气味。学生通过芳香气味等以上特征，进一步识认了铜绿假单胞菌。在常见的病人标本中，所检出的细菌菌落都具固有的特征和性状，就像人与人之间通过性格，特征就能区分开来。我们也应该把各种细菌在平板上的菌落特征加以描述，学生就较易接受学懂。
　　3、培养学生自学能力和动手能力。
　　专科和本科的学生在微生物室的实习时间大约有八至九周。在第一周，会安排学习培养基的制备，在此期间学习微生物室常用培养基的制备，如巧克力平板、SS平板、麦康凯平板、药敏平板、营养琼脂平板、淋基平板、肉汤管、双糖管、TCBS平板、4号琼脂平板等的制备过程。带教老师将边带边放手让学生自己做一些基本的操作，如消毒平板、配制培养基，天平称量，复溶琼脂加血，倒平板等基本功的操作。第二周学习梅毒初筛，确证试验和血清学的一些试验，也将学习衣原体、支原体的检测方法。第三到九周将学习细菌的鉴定。用一至两周时间学习各类标本的接种，平板的选择，平板分区划线，熟练掌握接种的流程。第五周开始学习各类细菌的生化鉴定和药敏试验。带教老师应结合平板上菌落形态。镜下革兰氏染色结果，各类平板上生长情况，病人的基本资料，诊断，本标来源等基本信息分析评述给学生听，逐步推论出细菌的大致方向，正确引导学生的思路。学生在每天应对比较常见而且较有意义的细菌进行鉴定，做生化反应及药敏试验，通过四周自己动手操作，能对临床上常见的细菌有一定的认识，能把菌鉴定到种。通过实践提高学生的动手能力，熟练掌握细菌室的基本操作技能。深化理论知识，使到理论与实践融会贯通。提倡学生多提问，有疑问老师及时解答与学生的学习相动。文档分类：
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文档介绍：
保证检验前的质量控制,并对合格的标本进行规范的接种,不同类别的标本按照不同的接种方法,选择不同的培养基,有针对性地分离出有临床意义的致病菌。
微生物实验室所有标本。
微生物实验室检验人员应遵守本程序。
4.1 标本接种的优先处理原则
所有标本到达微生物实验室后都需及时处理,依据标本的性质,制定标本优先处理的四个水平方针,第一水平的标本需立即接种处理,第四水平的标本可延迟处理,以下为临床标本优先处理的四个水平方针。
4.1.1 水平一标本
分类属于“危险的或易被污染的”,是由于疾病入侵性质的严重性或所检测的微生物对环境温度等较敏感,容易死亡。此类标本必须立即处理,包括脑脊液、心包液、血液、支气管肺泡灌洗液、心脏瓣膜。
4.1.2 水平二标本
未保护并且能很快退化或污染的菌群能很快大量繁殖,从而改变这些标本的性质,必须很快提供合适生长的环境,使这些标本中营养要求高的微生物得以生长繁殖。此类标本包括痰液、未被列入水平一的体液、组织、伤口分泌物、粪便、脓液等标本。
4.1.3 水平三标本
为需要定量的尿液或定量组织活检标本,延迟处理则会影响到标本检出菌量的精密度。
4.1.4 水平四标本
为床边接种入培养基中的标本(如放入碱性蛋白胨水、血培养瓶、运送培养基的标本),是具有保护的标本,为了处理好较高水平的标本,水平四标本可以延迟处理。
4.2 标本的编号
标本的编号规则根据检验目的的不同,按照标本的接收、标识程序中的编号规则进行编号。
4.3 标本的处理
4.3.1 血液标本
接受标本后,立即对标本进行编号、登记。门诊病人要登记联系方式。将血培养瓶置于全自动血培养仪中培养。抽取血液前,先将血培养瓶颠倒混匀,血培养瓶口用75%酒精消毒。
待酒精干燥后,用一次性1ml注射器抽出待检标本,滴少量待检标本在每块平板上的一区。接种在平皿上的标本采用三分区划线法划线。
4.3.2 痰、肺泡灌洗液、支气管毛刷、纤支镜吸痰标本
4.3.2.1 痰标本先用无菌接种环挑取标本涂片。
4.3.2.2 用无菌接种环挑取标本分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区,然后再划第二、第三区。
4.3.3 咽拭子、咽喉分泌物标本
用拭子分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区,然后再用无菌接种环划第二、第三区。
4.3.4 脑脊液标本
用无菌接种环挑取标本分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区,然后再划第二、第三区。并离心涂片检查。
4.3.5 伤口分泌物、脓液、抽取物、胸腹水等穿刺液
床边抽取体液标本5~10ml注入血培养瓶,若量少时(1~2ml)可直接置于无菌管中,立即送检。接受标本后,立即对标本进行编号、登记,置孵育箱培养。
4.3.6 粪便或肛拭子标本
取粪便脓血或粘液部分标本接种于SS平板和中国蓝平板和血平板。霍乱弧菌培养(不能用肛拭子标本)需接种碱性蛋白胨水、庆大平板和SS平板。
4.3.7 尿标本
将尿标本混匀,用10μl定量接种环立即接种血琼脂平板、中国蓝平板,分离细菌和菌落计数。
4.3.8 生殖道分泌物标本
用拭子分别涂布于血琼脂平板、巧克力平板、中国蓝平板的第一区,然后再用无菌接种环划第二、第三区。淋球菌培养直接接种于巧克力平板上。
4.3.9 以上标本真菌(念珠菌属)培养
加种一个沙保罗培养基。
4.4 标本的接种方法
4.4.1 平板划线接种法:平板划线接种法是最常用的分离培养细菌的方法,通过平板划线后,可使细菌分散生长,形成单个菌落,有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌。分离培养用的平板培养基应表面干燥,可在临用前置37℃孵育箱内30分钟,这样既有利于分离培养,又有利于培养某些对低温敏感的细菌(如脑膜炎奈瑟菌等)。划线接种时,接种环与培养基表面约成45°为宜。划线时应尽可能做到置、密、匀,有效地利用培养基表面达到充分分离细菌的目的。如果标本含菌较多,接种在强选择培养基上时或标本含菌较少时,采用分区划线接种,接种环可一直划完各区,不必灭菌。常用平板划线接种法有以下2种
4.1.1 分区划线法
4.4.1.1.1 此法用于痰液、粪便等含较多微生物标本的分离。
4.4.1.1.2 首先将接种环灭菌后冷却,沾取适量标本均匀划线5~6个往返于平板培养基第一区,将接种环火焰灭菌,待冷却,第二区接触第一区中央3~4次后连续划线5~6个来回,依次可分3~4区,最后烧灼接种环灭菌,每一区细菌数可逐渐减少,直至分离出单个菌落为止。
4.4.1.2 连续划线法
4.4.1.2.1 此法用于含菌量较少的标本(如中段尿)。
4.4.1.2.2 方法是首先用10μL定量接种环将标本以均匀直线涂布于平板培养基的中央一条线,然后用接种环在其自左向右连续划线并逐渐向下移动使标本均匀涂布于培养基平板上,不用烧环和分区。
4.4.2 斜面接种法:此法主要用于鉴定或保存菌种,或观察细菌的某些生化特性和动力。其方法为从平板分离培养物上用接种环挑取单个菌落或者是取纯菌种,移种至斜面培养基上,先从斜面底部自下而上画一条直线,再从底部开始向上画曲线接种,尽可能密而匀,或直接自下而上画曲线接种。如移种试管培养物时,可与斜面培养基管同持于左手,右手拿接种环的同时,小指与环指及环指与中指之间各拔取并夹持一个胶塞,取培养物直接接种于斜面培养基上,然后塞上胶塞,火焰灭菌管口和接种环。
4.4.3 穿刺接种法:此法用于保存菌种、观察动力或接种某些生化反应管。其方法是将纯菌插入半固体培养基的中央,穿刺至培养基的底部,然后沿穿刺线退出接种针,其他操作与斜面接种法类似。
4.4.4 液体接种法:本法多用于普通肉汤、真菌肉汤及蛋白胨水等液体培养基的接种。其方法是左手持培养基与菌种管,右手持接种环并夹持胶塞,经火焰灭菌试管口后,以灭菌并冷却后的接菌环沾取菌种,倾斜液体培养基管,先在液面与管壁交界处研磨接种物(试管直立后液体应淹没接种物为准),然后再在液体中摆动2~3次接种环将标本洗下,塞好胶塞后轻轻混匀。
4.5 接种步骤
4.5.1 选择所需的培养基,标明标本编号。
4.5.2 接种环使用前需用电热高温接种灭菌器进行灭菌,方法是将接种环伸入加热孔的高热区,停留5~7秒或以肉眼可见接种环变红为止。
4.5.3 具体划线接种操作根据具体需要按上述几种接种法进行。
4.5.4 划线接种完毕后,盖好平皿盖、将平板倒置(板盖朝下),试管插入试管架,检查标记号的标本号、接种日期等,按要求放入相应孵育箱培养。
1周庭银编著,临床微生物学诊断与图解(第二版).上海***,2007
2叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006
规范细菌鉴定标准操作规程。
2.适用范围
革兰阴性菌、革兰阳性菌等。
检验人员严格执行本程序。
4.1.观察菌落大小、颜色、气味、
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ELISA 试剂盒
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实验方法原理
巧克力平板应用羊血或免血制备。因其中含有Ⅹ和Ⅴ因子，嗜血杆菌、奈瑟氏菌等生长良好，凡疑有这些菌种存在的标本，均须接种巧克力平板。血液标本培养，增苗后有细苗生长，若移种巧克力平板上，有利于分离到更多的细菌。
成分：牛肉浸出液：
1000 ml蛋白胨：
10 g氯化钠：
1.5 g去菌脱纤维羊血液：
100 mlPH 7.~ 7.4制法：将前四项成分混合，加热融化，校正PH。高压灭菌压灭菌（121℃15min）后，约在80-90℃左右，无菌方法加人血液，摇匀后置90℃水浴中。维持该温度15min，使之成为巧克力色。取出，倾制平板。
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谁做这个实验？
觉得很简单
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点滴赞赏 温暖医生
好大夫在线温馨提示：大夫休息时间也在帮助病友哟，这份爱心是不是应该鼓励一下？(鼓励医生是自愿的，要量力而行哦)
眼睛分泌物多
男，6岁6个月。小孩四岁，前几天有点感冒咳嗽，眼睛开始出现黄色分泌物，睡醒较多，导致眼皮红肿，请问这是什么原因呢？是上火了吗？如何治疗？谢谢！
想获得的帮助:
请医生给我一些治疗上的建议,是否需要就诊？就诊前做哪些准备？
应该是结膜炎
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