染色时应注意事项 在进行HE染色时还应注意以下问题: 1.组织切片的脱蜡步骤应彻底否则无论进行那种染色都会发生困难。脫蜡时间要充分若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。 2.苏木素染液使用一段时間后表面易出现亮晶状飘浮物这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切爿后着色力会减弱,着色不鲜艳呈灰蓝色时应及时更换新液。 3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用室温条件,切片厚薄固定液的类别,染液的新旧而进行调节所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。 4.分化十分重要分化步骤的准確也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡过深等现象,因此分化后一定要镜检观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白銫否则需再次分化,不然一旦复染后组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。 5.还原液不宜过浓若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。 6.伊红宜淡染复染过深胞核会不清晰,影响镜检 7.若脱水,透明等步骤不够彻底则组织表面会有一层雾状膜。若有这一现象应立即更换纯酒精脱水,再次透明在潮湿的季节里应注意酒精的浓度、若降低要及时更换。 8.染色后的组织切片、要将组织四周的污染物痕跡擦掉以免影响美观。 9.封固剂要适量滴加时应小心倾滴,盖玻片要轻轻放置以免气泡产生影响镜检。盖玻片大小选择要合适一般要大于组织块,以防封盖不全盖玻片要放正,标签贴牢编号清楚。从而保证切片的封藏和美观 10.染好的切片应妥为保存,更应避免日光照射否则切片容易褪色。
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