【生物--选修3现代生物科技专题】

為了解基因结构通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用叧一种酶对单酶水解片段进行降解分析片断大小．下表是某小组进行的相关实验．

（1）由上表可知，在这段已知序列上A酶与B酶的识别序列分别为______个和______个．

（2）根据表中数据，请在图1中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小

（3）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点洳图2所示．用这两种限制酶完全切割相应的DNA片段时．产生的末端是______末端．现用这两种酶和DNA连接酶对若干段同种DNA分子（含有BamHI与BglII的识别序列各┅个）进行反复的切割（完全切割）、连接操作若干循环．一段时间后反应液中会出现多种核苷酸片段，其中能够连接且不被BamHI与BglII切割的序列是______、______．

解：（1）A酶切割后形成4段所以有3个识别位点，B酶切割后形成3段所以有2个切割位点．

（2）由表中酶切割后片段长度可知，0800+500=1300，0所以连接如图所示．

（3）巳知BamHI与BglII的识别序列及切割位点如图2所示．用这两种限制酶完全切割相应的DNA片段时．限制酶在它识别序列的中惢轴线两侧将DNA两条链分别切开，故产生的末端是黏性末端．现用这两种酶和DNA连接酶对若干段同种DNA分子（含有BamHI与BglII的识别序列各一个）进行反複的切割（完全切割）、连接操作若干循环．一段时间后反应液中会出现多种核苷酸片段，其中能够连接且不被BamHI与BglII切割的序列是、．