做蛋白纯化时的Tris base和Tris缓冲剂是一样的吗

点击联系发帖人 时间：2021-08-23 02:49

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h：在SDS－PAGE不连续电泳中制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中其pH環境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介於二者之间泳动由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度压着蛋白质分子聚集到一起，浓缩为一狭窄的区带当样品进入分离胶后，由于胶中pH的增加呈碱性，甘氨酸大量解离泳动速率增加，直接紧随氯离子之后同时由于分离胶孔径的缩小，在电场的作用下蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。' 但是浓缩胶配方抄错了以为分离胶和浓缩胶都是PH8.9，结果就那样跑了不知道这对结果有啥影响，请高手指点

蛋白质无法压缩到一起，在染色结果中条带粗大甚至与其它条带重叠拖尾现象也会很严偅。

PH不对胶都不好，也不会凝的

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还好，感觉跑出的条带还可以

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