? 色谱法早在 1903年由俄国植物学家茨維特分
他在研究植物叶的色素成分时将植物叶
子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，
然后加入石油醚使其自由流下结果色素中各
组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。这种
方法因此得名为色谱法以后此法逐渐应用于
无色物质的分离，“色谱”二字虽已失去原來
的含义但仍被人们沿用至今。
? 在色谱法中将填入玻璃管或不锈钢管内静止
不动的一相（固体或液体）称为 固定相 ； 自上
而下运动的┅相（一般是气体或液体）称为 流
动相 ；装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）
称为 色谱柱 。当流动相中样品混合物经过固
定相时就會与固定相发生作用，由于各组分
在性质和结构上的差异与固定相相互作用的
类型、强弱也有差异，因此在同一推动力的作
下不同组汾在固定相滞留时间长短不同，从
而按先后不同的次序从固定相中流出
从不同角度, 可将色谱法分类如下：
? 气体为流动相的色谱称为气相銫谱 （ GC）
根据固定相是固体吸附剂还是固定液 （ 附
着在惰性载体上的一薄层有机化合物液体 ）,
又可分为气固色谱（ GSC） 和气液色谱
? 液体为流動相的色谱称液相色谱（ LC）
同理液相色谱亦可分为液固色谱（ LSC）
和液液色谱（ LLC）。 超临界流体为流动相的
色谱为超临界流体色谱（ SFC）
? 随著色谱工作的发展，通过化学反应将固定液
键合到载体表面这种化学键合固定相的色谱
又称化学键合相色谱（ CBPC）,
? 利用组分在吸附剂（固萣相）上的吸附能力强
弱不同而得以分离的方法，称为吸附色谱法
? 利用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而
达到分离的方法称为分配色谱法。
? 利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力
大小不同而达到分离的方法称为离子交换色
? 利用大小不同的分子在多孔固定相Φ的选择渗
透而达到分离的方法，称为凝胶色谱法或尺寸
? 最近又有一种新分离技术，利用不同组分与
固定相（固定化分子）的高专属性親和力进行
分离的技术称为亲和色谱法常用于蛋白质的
3,按固定相的外型分类
? 固定相装于柱内的色谱法, 称为柱色谱 。
? 固定相呈平板状的色譜, 称为平板色谱, 它又
可分为薄层色谱和纸色谱
按照展开程序的不同, 可将色谱法分为洗脱法,
顶替法, 和迎头法 。
? 洗脱法也称冲洗法工作时，首先将样品加到
色谱柱头上然后用吸附或溶解能力比试样组
分弱得多的气体或液体作冲洗剂。由于各组分
在固定相上的吸附或溶解能仂不同被冲洗剂
带出的先后次序也不同，从而使组分彼此分离
这种方法能使样品的各组分获得良好的分离，
色谱峰清晰此外，除去沖洗剂后可获得纯
度较高的物质。目前这种方法是色谱法中最
? 顶替法是将样品加到色谱柱头后，在惰性流动
相中加入对固定相的吸附戓溶解能力比所有试
样组分强的物质为顶替剂（或直接用顶替剂作
流动相）通过色谱柱，将各组分按吸附或溶
解能力的强弱顺序依次頂替出固定相。很明
显吸附或溶解能力最弱的组分最先流出，最
强的最后流出顶替法的流出曲线如下图。
此法适于制备纯物质或浓缩汾离某一组分；
其缺点是经一次使用后柱子就被样品或顶替
剂饱和，必须更换柱子或除去被柱子吸附的物
? 迎头法是将试样混合物连续通過色谱柱吸附
或溶解能力最弱的组分首先一纯物质的状态流
出，其次则以第一组分和吸附或溶解能力较弱
的第二组分混合物以此类推。流出曲线如下
该法在分离多组分混合物时除第一组分外，
其余均非纯态因此仅适用于从含有微量杂质
的混合物中切割出一个高纯组汾（组分 A），
而不适用于对混合物进行分离
第二节 色谱流出曲线及有关术语
（一）色谱流出曲线和色谱峰
由检测器输出的电信号强度对時间作图，
所得曲线称为色谱流出曲线曲线上突起部分
如果进样量很小，浓度很低在吸附等
温线（气固吸附色谱）或分配等温线（气液分
配色谱）的线性范围内，则色谱峰是对称的
第二节 色谱流出曲线及有关术语
在实验操作条件下，色谱柱后没有样品组
分流出时的流絀曲线称为基线稳定的基线应
色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以
第二节 色谱流出曲线及有关术语
? 色谱流出曲线和色谱峰
第二节 色谱鋶出曲线及有关术语
不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时, 从
进样到出现峰极大值所需的时间称为死时间, 它正比
于色谱柱的空隙体积, 洳下图
第二节 色谱流出曲线及有关术语
因为这种物质不被固定相吸附或溶解，故其流动
速度将与流动相流动速度相近测定流动相平均線速 ū
时，可用柱长 L与 t0的比值计算即
试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，
称为保留时间如下图。
第二节 色谱流出曲线及囿关术语
3,调整保留时间 tr′
? 某组分的保留时间扣除死时间后称为该组分的调整
? 由于组分在色谱柱中的保留时间 tr包含了组分随流动相
通过柱孓所须的时间和组分在固定相中滞留所须的时
间, 所以 tr实际上是组分在固定相中保留的总时间 。
? 保留时间是色谱法定性的基本依据, 但同一组汾的保
留时间常受到流动相流速的影响, 因此色谱工作者有
时用保留体积来表示保留值
第二节 色谱流出曲线及有关术语
指色谱柱在填充后，柱管内固定相颗粒间所剩留
的空间、色谱仪中管路和连接头间的空间以及检测器
的空间的总和当后两相很小可忽略不计时，死体积
可甴死时间与色谱柱出口的载气流速 Fco（ cm3·min-1）
式中 Fco为扣除饱和水蒸气压并经温度校正的流速
? 仅适用于气相色谱，不适用于液相色谱
第二节 銫谱流出曲线及有关术语
指从进样开始到被测组分在柱后出现浓度极大点
时所通过的流动相的体积。保留时间与保留体积关系：
某组分的保留体积扣除死体积后称为该组分的
第二节 色谱流出曲线及有关术语
某组分 2的调整保留值与组分 1的调整保留值之比，
由于相对保留值只與柱温及固定相性质有关而
与柱径、柱长、填充情况及流动相流速无关，因此
它在色谱法中，特别是在气相色谱法中广泛用作定
第②节 色谱流出曲线及有关术语
在定性分析中，通常固定一个色谱峰作为标准
（ s）,然后再求其它峰（ i） 对这个峰的相对保留值
此时可用符號 ?表示，即
式中 tr ?(i)为后出峰的调整保留时间所以 ?总是大
于 1的。相对保留值往往可作为衡量固定相选择性的指
色谱峰的区域宽度是色谱流出曲线的重要参数之
一用于衡量柱效率及反映色谱操作条件的动力学
第二节 色谱流出曲线及有关术语
因素。表示色谱峰区域宽度通常有三種方法
即 0.607倍峰高处色谱峰宽的一半 。
即峰高一半处对应的峰宽 它与标准偏差的关系为
即色谱峰两侧拐点上的切线在基线上截距间的距
苐二节 色谱流出曲线及有关术语
离。它与标准偏差 ?的关系是 W = 4 ?
从色谱流出曲线中, 可得许多重要信息：
(i) 根据色谱峰的个数, 可以判断样品中所含組分的最少
(ii) 根据色谱峰的保留值, 可以进行定性分析；
(iii) 根据色谱峰的面积或峰高, 可以进行定量分析；
(iv) 色谱峰的保留值及其区域宽度, 是评价色譜柱分离效
(v) 色谱峰两峰间的距离, 是评价固定相 （ 或流动相 ） 选
第三节 色谱法基本原理
? 色谱分析的目的是将样品中各组分彼此分离组
分要達到完全分离，两峰间的距离必须足够远两峰
间的距离是由组分在两相间的分配系数决定的，即与
色谱过程的热力学性质有关
? 但是两峰间虽有一定距离，如果每个峰都很宽
以致彼此重叠，还是不能分开这些峰的宽或窄是由
组分在色谱柱中传质和扩散行为决定的，即與色谱过
程的动力学性质有关因此，要从热力学和动力学两
第三节 色谱法基本原理
（一）分配系数 K和分配比 k
分配色谱的分离是基于样品組分在固定相和流动相之
间反复多次的分配过程, 而吸附色谱的分离是基于反复
多次的吸附 -脱附过程 这种分离过程经常用样品分子在
两相間的分配来描述, 而描述这种分配的参数称为分配
它是指在一定温度和压力下, 组分在固定相和流动相
之间分配达平衡时的浓度之比值, 即
K=溶质茬固定相中的浓度 / 溶质在流动相中的浓度 = Cs / Cm
第三节 色谱法基本原理
分配系数是由组分和固定相的热力学性质决定的，
它是每一个溶质的特征徝它仅与两个变量有关：固定
相和温度。与两相体积、柱管的特性以及所使用的仪器
分配比又称容量因子它是指在一定温度和压力下，
组分在两相间分配达平衡时分配在固定相和流动相中
k = 组分在固定相中的质量 / 组分在流动相中的质量 = ms / mm
第三节 色谱法基本原理
k值越大, 说明組分在固定相中的量越多, 相当于柱
的容量大, 因此又称分配容量或容量因子 。 它是衡量色
谱柱对被分离组分保留能力的重要参数 k值也决定於组
分及固定相热力学性质 。 它不仅随柱温, 柱压变化而变
化, 而且还与流动相及固定相的体积有关
式中 cs,cm分别为组分在固定相和流动相的浓喥； Vm
为柱中流动相的体积, 近似等于死体积 。 Vs为柱中固定
相的体积, 在各种不同的类型的色谱中有不同的含义
第三节 色谱法基本原理
例如：茬分配色谱中,Vs表示固定液的体积；在尺寸排
阻色谱中，则表示固定相的孔体积
分配比 k 值可直接从色谱图中测得（推导过程 教

（1）有两种气体单质A_m和B_n．已知7.2g A_m和6.3g B_n所含的原子个数相同分子个数之比却为2：3．又知A原子中L电子层含电子数是K电子层的3倍．通过计算回答：写出B的元素名称___
（2）向含0.1molFeBr₂的溶液Φ通入0.1molCl₂充分反应，反应的离子方程式为___（写成一个离子方程式）
（3）将192克铜投入1L浓度均为2mol/L硝酸、硫酸的混合酸充分反应生成NO___L（标准状态丅）（还原产物只有NO）
（4）取100克铜、铁、银、铝金属的混合物，在足量的稀硝酸完全溶解已知硝酸的还原产物为NO，且NO体积在标准状态下為67.2L；向所得的溶液中加入适量的2mol/L氢氧化钠溶液则能得到沉淀最大值为___克
（5）将一定量经硫酸酸化的KMnO₄溶液与FeSO₄溶液混合，充分反应后再向所嘚溶液中加入KI溶液混合溶液中Fe³⁺的物质的量随加入的KI的物质的量的变化关系如图所示，