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肠道标本的细菌学检查_图文_百度文库
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肠道标本的细菌学检查
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沙门菌属ppt-医学微生物学课件
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1.葡萄糖代谢类型鉴别试验(O/F或Hugh-Leifson,HL)
下层:蛋白胨????1克 氯化钠????0.5克 葡萄糖????0.2克 水 100毫升Bromo cresol purple 乙醇溶液0.1-0.2mL
注意: 调完pH值后再加葡萄糖.
1 原理:细菌在分解葡萄糖的过程中,必须有分子氧参加,称为氧化型;能进行无氧降解的为发酵型;不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖,而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。本试验又称氧化发酵(O/F或Hugh-Leifson,HL)试验,可用于区别细菌的代谢类型。
2 方法:挑取少许纯培养物(不要从选择性平板中挑取)接种2支HL培养管中,在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气(作为密封管),另一管不加(作为开放管)。置3℃孵箱孵育48h以上。
3 结果:两管培养基均不产酸(颜色不变)为产碱型;两管都产酸(变黄)为发酵型;加液体石蜡管不产酸,不加液体石蜡管产酸为氧化型。
4 应用:主要用于肠杆菌科与其它非发酵菌的鉴别。肠杆菌科、弧菌科细菌为发酵型,非发酵菌为氧化型或产碱型。也可用于鉴别葡萄球菌(发酵型)与微球菌(氧化型)。
2.氧化酶试验
1 原理:氧化酶又称细胞色素氧化酶,是细胞色素氧化酶系统中的最终呼吸酶。此酶并不直接与氧化酶试剂起反应,而是先使细胞色素C氧化,然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化,产生颜色反应。因此,本试验结果与细胞色素C的存在有关。
2 方法:取洁净滤纸条,沾取菌落少许,加氧化酶试剂(10g/L盐酸四甲基对苯二胺水溶液或10g/L盐酸二甲基对苯二胺水溶液)1滴,1min内观察结果。也可将试剂滴加到菌落上进行试验。
3 结果:阳性者立即变粉红色,5-10s内呈深
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沙门菌检测技术
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