&您现在的位置：&>&&>&&>&
共有&19&人回复了该问答如何配制标准曲线？
我们在进行生物样品分析时，需要建立生物样品分析的标准曲线。我知道的方法有两种：一种是化合物的储备液用有机溶剂，如甲醇、乙腈来稀释得到工作溶液，然后按照方法将一定量的工作溶液加入到生物基质如血浆中，进行处理后进样分析；另外一种方法是化合物的储备液用合适的溶剂来溶解，然后一直使用生物基质来稀释，然后按照样品处理方法来处理。从事生物样品分析的站友，你们是如何配制生物标准曲线的？上面两种做法你倾向于哪一种？为什么？欢迎参与讨论……注：如出现“学习了、谢谢、顶”等语句，均被认定为水帖，删无赦。
回复于： 17:22:58我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线，然后按照一定比例加到介质中去，加进去的有机溶剂比例在2%内！
回复于： 14:25:21我是用后者，配制一定浓度的化合物的储备液（一般用甲醇定容），然后用生物基质来一步步稀释，配成几个点的标准溶液，然后按照样品处理方法来处理，进样。这样做线性确实不好把握，但每一步都精准处理的话达到两个9还是没问题的（液质联用）。至于第一中，只能在线性一直不好的时候配一条溶剂溶解的曲线找问题，真正意义不大。
回复于： 12:23:22这两种做标准曲线的方法我都没有用过，如果将标准溶液添加到样品中作前处理，这不就是所谓的工作曲线么，如果使用基质加标做曲线，一个点所加的应该也是一样的，不然就没法衡量和比较了。
回复于： 22:17:39如果说是要接近真正的样品，那么储备液和工作液最好都是水溶的，毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题，很少使用纯水溶解的。我一般用第一种方式做标准曲线。原因大概是：1 用第二种，标曲各个点的有机溶剂含量不同，这样基质就不同，用质谱测定，高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的，所以一般也不考虑。
回复于： 20:50:15至少5个浓度，以及配制另一个对照进行回收试验。
快速回复【花三五分钟，帮别人解决一个问题，快乐自己一天！】
回复于： 16:12:43
从干扰的角度出发是按照样品处理方法来处理，但是这样的线性差点
回复于： 16:15:08
原文由 emoc98311 发表:从干扰的角度出发是按照样品处理方法来处理，但是这样的线性差点请楼主说的详细点。你的曲线是如何配制的？
回复于： 16:22:05
为了线性更好，稀释不加基质
回复于： 16:24:45
原文由 emoc98311 发表:为了线性更好，稀释不加基质楼主这样做，符合有关的规定吗？这能叫模拟生物样品吗？
回复于： 17:22:58
我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线，然后按照一定比例加到介质中去，加进去的有机溶剂比例在2%内！
回复于： 17:25:54
原文由 dickwang2008 发表:楼主这样做，符合有关的规定吗？这能叫模拟生物样品吗？科学的做法当然是你说的方法，但是现在很多文章也在做假至少文章中的回收率就有很多都是修改过的做线性我喜欢第二法，因为它更接近样品，结果也会更准确
回复于： 17:30:38
原文由 emoc98311 发表:原文由 dickwang2008 发表:楼主这样做，符合有关的规定吗？这能叫模拟生物样品吗？科学的做法当然是你说的方法，但是现在很多文章也在做假至少文章中的回收率就有很多都是修改过的做线性我喜欢第二法，因为它更接近样品，结果也会更准确我们不管作假与否，因为这个与我们无关，也不是我们能决定的。我们只是在探讨方法哪种更适合，从试验角度出发。所以也希望后来的参与者能从这个角度出发进行探讨。
回复于： 20:50:15
至少5个浓度，以及配制另一个对照进行回收试验。
回复于： 22:17:39
如果说是要接近真正的样品，那么储备液和工作液最好都是水溶的，毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题，很少使用纯水溶解的。我一般用第一种方式做标准曲线。原因大概是：1 用第二种，标曲各个点的有机溶剂含量不同，这样基质就不同，用质谱测定，高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的，所以一般也不考虑。
回复于： 12:23:22
这两种做标准曲线的方法我都没有用过，如果将标准溶液添加到样品中作前处理，这不就是所谓的工作曲线么，如果使用基质加标做曲线，一个点所加的应该也是一样的，不然就没法衡量和比较了。
回复于： 14:25:21
我是用后者，配制一定浓度的化合物的储备液（一般用甲醇定容），然后用生物基质来一步步稀释，配成几个点的标准溶液，然后按照样品处理方法来处理，进样。这样做线性确实不好把握，但每一步都精准处理的话达到两个9还是没问题的（液质联用）。至于第一中，只能在线性一直不好的时候配一条溶剂溶解的曲线找问题，真正意义不大。
回复于： 19:53:22
方法中有说明啊，一般的如测IgG含量的就是直接法了！我们也有跟标准方法不一样的检测方法，但都是建立在实践的基础上的，有文件证明它能够测得并且可标准方法没有明显的差异！
回复于： 20:11:41
因为生物基底比较复杂，可能对目标物在仪器的响应上影响比较大，所以个人理解用后一种方法比较好。化合物的储备液用合适的溶剂来溶解，然后一直使用生物基质来稀释，然后按照样品处理方法来处理。
回复于： 10:30:52
第一种，第二种从来没试过，太费
回复于： 12:20:17
曲线的标准的配制是根据具体情况去区分的，有些化合物在特定的基质的条件下有的会增效有的抑制，对于这种比较复杂的生物样品一般采用第二种，当然现在的情况是由于这样的阴性样品不好找（有时）。因此现在一般采用的第一种的比较多，采用第一种的方式如果同时采用内标法定量的话，以上所有的问题都可以解决。因此，具体情况具体分析
回复于： 12:30:23
原文由 juju11 发表:如果说是要接近真正的样品，那么储备液和工作液最好都是水溶的，毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题，很少使用纯水溶解的。我一般用第一种方式做标准曲线。原因大概是：1 用第二种，标曲各个点的有机溶剂含量不同，这样基质就不同，用质谱测定，高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的，所以一般也不考虑。对于你说的第二种方法有机溶剂含量不同，我的个人看法是：首先从高浓度的溶液A往下稀释，这个A溶液就已经是生物样品溶液，而且有机溶剂的含量控制在2%以下。后面各个浓度点的样品均是采用生物基质来稀释，这样在样品中有机溶剂的含量就会很小，几乎是微乎其微。所以基质不会有太大不同。对于第一种方法，对于有些化合物很难用水来溶解，所以这就是一个很难解决的问题。
回复于： 23:03:14
这两种方法我都用的，个人倾向后一种，即稀释法，而标准加入法（即第一种）在参考文献中比较常见。&
现如今系列标准溶液配制可以自动化了，这使得标准加入法显得很方便，而且空白生物基质利用率很高。但是这我不能补偿我的担心，毕竟生物基质中加入有机溶剂影响是不确定的。我上一次采用标准加入法做方法学验证，在做冻融稳定性发现，血浆因为加入了少量乙腈成果冻状了，个别样品萃取时很难分散，自然的结果就偏低了。&
稀释法配制的血浆和实际血浆更加接近，虽然不同浓度血样有机溶剂含量不一样，但是只要控制在一定的范围内是不会影响线性范围的。稀释法需要的空白生物基质较多，在基质不好弄的时候就比较麻烦了，比如做胆汁或者是小鼠的血样。&
个人认为对大多数药物而言这两种方法对测定结果不会产生明显差异。
回复于： 23:44:09
第二种简单一些，易于操作。
回复于： 11:19:38
第一种好处理吧，影响少一点吧，第二种更接近实际，但比较复杂，影响较大吧！
未解决问题原子吸收光谱（AAS）
主题：【求助】标准曲线的两层意义？标准曲线是否要加入零点？
浏览 |回复11
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：v3084283
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_3084283 jietielvname_v0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
发表于： 15:57:38
标准曲线的两层意义？标准曲线是否要加入零点？哪位大神可以帮帮忙？谢谢!
该帖子作者被版主
qq 加 2 积分，
2经验，加分理由：鼓励发帖
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：hsz123456
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_2198998 jietielvname_hsz0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
标准曲线原则上要加入零点。标准曲线一是用来验证分析条件是否正确，二是用于定量。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：xky0230699
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_1638724 jietielvname_xky0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
由于背景干扰、仪器稳定性等因素影响，0浓度能过0点纯属偶然，所以一般不强制过0点，而采用减空白的方式。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：bestxwj
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:由于背景干扰、仪器稳定性等因素影响，0浓度能过0点纯属偶然，所以一般不强制过0点，而采用减空白的方式。 我们这边检测食品的，样品含量都比较低，大部分都是零点和最低点之间，所以我们这里都要求强制过零点，不知道这样做是否可行，因为我们这里老师说不过零点就没法计算！
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：<span class="gray0 username_199825
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_1012551 jietielvname_0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 bestxwj(bestxwj) 发表: 我们这边检测食品的，样品含量都比较低，大部分都是零点和最低点之间，所以我们这里都要求强制过零点，不知道这样做是否可行，因为我们这里老师说不过零点就没法计算！ 这样算出来的结果准确度不会很高吧？样品含量在零点和最低点之间，应该考虑选择灵敏度更高的分析方式，或者对样品进行浓缩或富集处理，使样品的含量在标准曲线的浓度范围内。还有一种情况，如果只是判断样品含量是否超过限值含量，可以根据限值计算相应的标准浓度，然后采用强制过零点的单点曲线方式，计算样品的大致含量判断样品是否超标。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：yang_qingwen
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
虽然标曲的确应该过零点，但实际上总是有截距。截距越小越好，我个人觉得最大不应超过0.0020，太大就不正常了。强制过零点无视系统测定误差，我个人不赞成这么做
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：m3071659
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_3071659 jietielvname_m0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
AAS常常过原点
qianguiyun1
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：qianguiyun1
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
不一定要过原点
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：hsz123456
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_2198998 jietielvname_hsz0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
含量太低可不可以增加称样量？
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：shadow_hlr
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：100%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由 m71659) 发表:AAS常常过原点 没遇过能过原点的，除非你选强制过零点。
<p class="orgred oe jinghua_
<p class="orgred oe tiezi_
<p class="orgred oe huitie_
ID：m3071659
行业：石油行业―校长油行业―校长油行..
积分：<span class="gray0 userintegral_升级还需100积分
声望：<span class="gray0 userrenown_升级还需100声望
注册时间：
最后登录时间：<span class="gray0 userlastl_00-00-00
结帖率：<div class="loading jietielv_3071659 jietielvname_m0%
关注： |粉丝：
新手级：&新兵
原文由七月(shadow_hlr)发表:原文由 m71659) 发表:AAS常常过原点 没遇过能过原点的，除非你选强制过零点。改天做原吸，截图给你看看小木虫 --- 500万硕博科研人员喜爱的学术科研平台
&&查看话题
做标准曲线，配标准溶液时，用移液枪好还是移液管好？吸量管能不...
做标准曲线，配标准溶液时，用移液枪好还是移液管好？吸量管能不能用？标曲多长时间做一次比较好？ voyager88
研究生必备与500万研究生在线互动！
扫描下载送金币硫酸银纯度对硝酸盐测定的影响及消除措施
&|&&|&&|&&|&&|&&|&&|&&|&&|&&|&
您现在的位置：&&>>&&>>&&>>&论文正文
硫酸银纯度对硝酸盐测定的影响及消除措施
作者：李杰 &&点击数： &&更新时间： 13:24:15
李杰(天津大港油田集团供水供电公司　天津　大港　300280）
摘要：硫酸银纯度对硝酸盐氮测定结果的影响较大，试剂经精制提纯后，空白值明显下降，线性关系提高，取得理想的效果。关键词：硝酸盐测定 硫酸银纯度 分光光度法
　　《生活饮用水卫生规范（2001）》中增加了麝香草酚法测定生活饮用水中的硝酸盐氮。该方法不仅能有效消除Cl-对测定结果的干扰，而且大大缩短了操作时间，特别适合于大批量的检测工作。但在实际检测工作中发现硫酸银的纯度对检测结果有很大的影响，按照该规范操作，标准回归曲线的截距较大，空白值较高。主要原因是麝香草酚法为保证反应对酸度的要求将取样量减少到1.00，这就对试剂的纯度有了更高的要求。笔者经过多次试验，认为对硫酸银进行精制提纯能有效消除硫酸银中硝酸根杂质对测定结果的影响，效果理想。
1 仪器及试剂
　　仪器：752型分光光度计，波长415nm。试剂：硫酸银 硫酸及其它试剂均为分析纯。
2 实验步骤　　（1） 配制不同浓度硝酸盐标准系列并稀释至1.0mL，各管中加入0.1mL氨基磺酸铵溶液（20g/L），摇匀后放置5min；各加入0.2mL麝香草酚乙醇溶液（5g/L），摇匀后加入2mL硫酸银-硫酸溶液（10g/L），混匀放置5min，各加纯水8min，混匀后滴加浓氨水至溶液黄色达到最深，并使氯化银沉淀完全溶解为止，各加纯水至25mL刻度，比色测定。　　（2） 用提纯前的硫酸银配制硫酸银-硫酸溶液对含有不同浓度硝酸盐氮的系列进行检测，并对硝酸盐标准曲线进行回归，结果见图1。
图1　硝酸盐标准回归曲线
　　分析认为：硫酸银纯度对实验结果的影响显著，虽然选用市售分析纯试剂，但从回归曲线回归结果来看，线性回归系数r2=0.9839，截距达到0.3401，不能满足分光分析的要求，有必要进行精制提纯。　　（3） 提纯方法：分析认为是纯度干扰，可能是硫酸银中含有硝酸根离子，将其去除即可达到纯化地目的，设计提纯方案：利用不挥发性酸制挥发性酸的原理。　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　4HNO3→NO2↑+O2↑+h2O　称取20.0g硫酸银溶于10mL浓硫酸溶液中，加热至熔融状态10min，冷却后，加少量纯水分次洗涤至近中性，过滤、干燥。称取1.0g溶于100mL浓硫酸中，备用；尝试用重结晶法精制硫酸银，效果不理想。　　（4） 效果验证　　 a．标准曲线检验 按标准浓度加入经提纯精制的硫酸银与不加硫酸银同时绘制硝酸盐氮标准曲线：
图2 Ag2SO4的加入对回归曲线的影响
Y=0.038X+0.0107
自变量的差方和
自变量的平均值
剩余标准差（SE）
因变量的平均值
剩余标准差的自由度
检验sE1= sE2
F=S2max/S2min=0.32=1.19& F0.05（7，7）=3.79
T0.05（14）=2.145&OtO
T0.05（14）=2.145&OtO
　　通过对不加硫酸银和加入精制提纯后的硫酸银所绘制回归曲线进行统计检验，证明： (1) 两曲线的剩余标准偏差无明显差异，因此认为两条回归曲线精度相等； (2)两曲线回归系数没有明显差异； (3) 两曲线回归截距没有明显差异。　　 经检验，两条曲线没有明显差异。从而证明加入精制提纯后硫酸银不会对测定结果的精确度产生影响，即证明提纯方法有效。　　b．回收率检验　　先后对含不同硝酸盐浓度的系列多次进行平行测定，平均回收率达100.04%，因此该方法的准确度较高。
标样浓度/（mg/L）
测定浓度（mg/L）
回收率（%）
　　硫酸银纯度对实验结果影响较大，虽然市售分析纯试剂标签中显示硝酸盐含量为0.001%（该浓度在实验中产生0.04516mg/L（以氮计）的误差），而在实际检测中，硫酸银纯度产生的误差达9.518mg/L（以氮计），则硫酸银中硝酸盐的含量达0.21%，是标示值的210倍。经过提纯以后，回归曲线的质量明显提高，空白值明显下降，线性相关系数r2=0.9999；测定结果精密度、回收率、准确度都符合要求。经试剂提纯，能够有效消除硫酸银纯度的对硝酸盐氮测定的影响，适合在检测过程中发生类似问题时采用。
作者简介：李杰，大港油田集团供水供电公司滨海水厂，邮编：300280，电话：022-，E-mail：。
信息来源：工业水处理
上一篇论文： 下一篇论文：
版权申明：本站引用因特网上的资源尽量注明来源和出处，版权归原作者及网站所有，如果您对本站文章版权的归属存有异议，请您联系我们，我们会马上做出明确答复。
&& 网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！）
站内论文搜索
我要发表评论
* 游客填写 　
评论内容：
* 请各位网友遵纪守法并注意语言文明。
* 评论内容只代表网友个人观点，与本网站立场无关。
广 告 信 息
没有相关论文
网站备案号：鄂ICP备号
联系电话：6 或
版权所有 Copyrights & 2006 中国环保技术网 All Rights Reserverd.更多公众号：gh_68d999decbb5不拼颜值靠实力做成《Lab-帅》!最新文章对这篇文章不满意？您可以继续搜索：百度：搜狗：感谢您阅读盘点那些年网友们讨论过的ICP-MS使用常见问题，本文可能来自网络，如果侵犯了您的相关权益，请联系管理员。QQ:}