将15只某医师随机抽取正常大白鼠13只随机分配三个饲料组一个月后观察尿中氨基氮的排出量(完全随机设计)?

1.二乙基亚硝胺(DEN)诱发大白鼠肝癌

(1)取体重250 g左右的封闭群大白鼠,雌雄不拘;

(2)按性别分笼饲养。除给普通食物外,饲以致癌物,即用 0.25%DEN水溶液灌胃,剂量为10 mg/kg,每周一次,其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中,任其自由饮用;

(3)共约4个月可诱发成肝癌;

(4)也可以单用0.005%掺入饮水中口吸服8个月诱发肝癌。

2.4-2甲基氨基氮苯(DBA)诱发大鼠肝癌

(1)用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠,饲料中维生素B2 不应超过1.5~2 mg/kg;

(2)4~6月就有大量的肝癌诱发成功。

3.2-乙酰氨基酸(2AAF)诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌

(1)给成年大鼠含0.03% 2AAF标准饲料;

(2)每日每平均2~3 mg 2AAF(也可将2AAF混于油中灌喂),3~4月后有80~90%动物产生肝肿瘤。

4.二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌:

(1)用剂量为每日0.3~14 mg/kg体重,混于饲料或饮水中给予;

(2)6~9个月后255/300大鼠发生了肝癌。

5.亚胺基偶氮甲苯(OAAT)诱发小鼠肝癌

(1)用1%OAAF苯溶液(约0.1 ml含1 mg)涂在动物的两肩胛间皮肤上,隔日一次,每次2~3滴,一般涂100次。

(2)实验后7~8周即而出现第一个肝肿瘤,7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。

(3)或用2.5 mg OAAT溶于葵瓜子油中,给C3H小鼠皮下注射4次,每日间隔10天,也可诱发成肝癌。

6.黄曲霉素诱发大鼠肝癌

(1)每日饲料中含0.001~0.015 ppm,混入饲料中喂6个月后,肝癌诱发率达80%。

1.甲基胆蒽诱发小鼠胃癌

(1)取20 g左右的小鼠,无菌手术下,在腺胃粘膜面穿挂含甲基胆蒽(MC)线结。

(2)含MC的线结是用普通细线,在一端打结后,将线结置于盛有MC小玻璃试管内,在酒精灯上微微加温,使MC液化渗入线结。MC浓度为0.05~0.1 g 20-甲基胆蒽内浸入10~20根线。

(3)手术埋线后4~8个月可诱发成功胃癌。

2.不对称亚硝胺诱发小鼠胃癌

剂量为0.25 ml/kg体重,3个月后全部动物发生前胃乳头状癌,7~8个月后有85~100%发生前胃癌。昆明种最敏感。A系次之,615系小鼠敏感性最差。

给BD大鼠饮水中加甲基亚硝基醋酸尿素,剂量为2 mg/kg体重,每周饮用5次,520天后全部大鼠均发生了腺胃癌。

1.甲基苄基亚硝胺(MBNA)诱发大鼠食管癌

(2)任其食用含甲基苄基亚硝胺的饮水,并将MBNA掺入饲料中使每日摄入量达0.75~1.5 mg/kg体重;

(3)80~100天可诱发成食管癌。

(1)二烃黄樟素是一种制备啤酒的调味品,在大鼠饲料中加入百万分之二千五百至一万(2500~10000 ppm)黄樟素,就能引起20~75%的食管癌。

3.甲基苄基亚硝胺诱发大鼠食管癌

(1)用0.2%或0.005% 的甲基苄基亚硝胺水溶液,给动物经口灌喂,每天一次,大鼠灌注剂量为1 mg/kg体重;

(2)至第27天即发现一例食管乳头状瘤,154天发现第一例食管癌, 11个月食管癌的发生率为53%。

1.二乙基亚硝胺(DEN)诱发小鼠肺癌

(1)小白鼠每周皮下注射1%DEN水溶液一次,每次剂量56 mg/kg,DEN总剂量达到868 mg;

(2)观察时间为100天左右时,发癌率可达40%。

(3)DEN总剂量达到1176 mg,观察时间为半年左右时;发癌率可达94%。

(1)小鼠(A系, 1~11/2月龄)较大鼠敏感,每次每只腹腔注入10%乌拉坦生理盐水液0.1~0.3 ml,间隔3~5日再注,共注2~3个月,每只小鼠用量约为 100 mg;

(2)注后3个月肺腺癌发生率为100%,而且多数为多发性,这种诱发瘤为良性。

(1)猴气管内注入3,4-苯并芘(苯并花为3~15 mg与等量之Fe2O3混合液),每周一次,共10次;

(2)6只猴中有2只诱发肺的鳞状上皮癌。

4.硫酸铵气溶胶诱发肺腺癌

(1)用硫酸胺气溶剂给100只大鼠吸入;

(2)13个月后所有大鼠都发生了肺腺癌。

5.甲基胆蒽诱发肺腺癌

(1)用0.2%明胶作悬浮剂将甲基胆蒽混合后给金地鼠气管内注入,每次0.1 ml(含甲基胆蒽 5 mg)每周一次,共6次;

(2)53周后有62.5%动物发生了肺癌。

1.二甲基胆蒽(MC)诱发大鼠鼻咽癌

(1)取直径2~3 mm的硬质塑米管,在酒精灯上小火拉成锥形,每段长约3.5 cm,管内填以结晶体MC。

(2)小管一端用火封闭,以防药物外溢,尖端用针刺数孔,使MC能从小妃溢出。

(3)取体重120 g左右的大白鼠,雌雄均可,乙醚麻醉后,由前鼻孔将上述含MC的塑料小管插入鼻腔,利用前鼻孔较小管粗端为小的特点,稍加用力,迫使小管全部进入鼻腔内,其尖部可达鼻咽腔。不需另加固定,即可使小管长期留于鼻腔内。

(4)待到预定时间(半年以上),或动物自行死亡时,到其鼻咽部,10%福尔马林固定,脱钙后,石蜡包埋,进行连续切片。发癌率可达60%以上。

2.二乙基亚硝胺滴鼻法诱发鼻咽癌

(1)取120 g左右大白鼠,雌雄均可,乙醚麻醉后,用磨平针尖的8号针头,从前鼻孔轻轻插入,针尖可达鼻咽腔;

取雌性小白鼠,以附有0.1 mgMC的棉纱线结在动物不麻醉的状态下,借助于阴道扩张器及磨纯的弯针,将线穿入宫颈。经右宫角背部穿出,使线结固定于宫颈口。线的另一端则固定于背部肌肉,缝合皮肤,挂线以后,同日开始连续注射青霉素2~3天。以防术后感染。至一定时间(半年左右)处死动物,宫颈组织用10%福尔马林固定,石蜡包埋,连续切片。

(1)给四周龄的雄性大白鼠,皮下注射二甲基苄肼(Dimethlhydrazine,DMH)每周一次,连续21周,每次 DMH21 mg/kg;

(2)最后一次给药后1~4周,处死动物;

(3)降结肠部位用Bouin液固定,脱水,石蜡包埋,切片。所用之DMH先配成每100 ml含 400 mg的母液,并加EDTA37 mg,用氢氧化纳(0.1 N)液将pH调至6.5备用。

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实验动物 及其在生物医学研究中的应用;;小 鼠 Mouse,Mus musculus ; 小鼠属脊椎动物门,哺乳纲,啮齿目,鼠科,小鼠属的动物,别名鼷鼠,实验用小鼠来源于野生鼷鼠,经人们长期选择培育而成。具有20对染色体和相同数量的连锁群。 小鼠来源于中国,最早仅作为宠物来饲养,从17世纪开始就用于解剖学研究及其他动物实验中,此后在欧洲小鼠用作被毛毛色遗传性状的研究中。 小鼠是目前应用最广泛、被研究的最清楚、最深入的实验动物;已育成的品种品系有500多种。是一般实验室所用实验动物中体格最小、用量最多的实验动物之一,约占全部实验动物用量的40%~80%。;一、生物学特性;(2). 喜居光线暗的安静环境,昼伏夜出 (3). 性情温顺,易于饲养管理 小鼠经过长期的人工培育,性情温顺,易于抓捕,不会主动咬人;一般很少相互咬斗,是理想的实验动物。雄性好斗,性成熟的雄鼠放在一起时,易发生互斗并咬伤,但同窝的小鼠离乳后放在同笼内饲养,则不发生互斗。雄鼠分泌的醋酸铵有臭味。当饲养室内有人时,小鼠的活动受到一定的抑制,甚至停止。受惊时,尾巴挺直并猛摇,如强光或噪声刺激可导致哺乳母鼠神经紊乱,发生食仔现象。 (4).喜群居 为群居性动物。群饲时,饲料消耗量比单个时多,生长发育也快。群养时雌雄要分开,并不能过为拥挤,否则会抑制生殖能力。群居时,群居优势在雄性中很明显,表现为群体中处于优势者保留胡须,被称为“理发师”,而处于劣势者胡须被拔光。 (5).喜欢啃咬 小鼠是典型的啮齿类动物,门齿终生生长。小鼠有啃咬习惯,以此来磨损门齿并保持其长短的恒定。;2.生理学特性 ;(2).生殖生理 小鼠发育迅速,性成熟早。6~7 周龄时性成熟;体成熟,雄鼠为 70~80 日龄,雌鼠为 65~75 日龄。 小鼠一年四季均有性活动,性周期明显,为 4~5 d,一般在发情后 2~3 h 即可排卵,性活动一般分为发情前期、发情期、发情后期和发情休息期。性周期各阶段的特征,可用阴道分泌物涂片和组织学检查加以区分。 精囊、前列腺、尿道球腺等生殖器官具有分泌精液的功能,这些分泌物是推动精子前进的必要条件,并在雌鼠阴道和子宫颈中凝固,形成阴道栓。 小鼠为“Y”型双角子宫。妊娠期为 20 d 左右,哺乳期为 20~22 d,每胎产仔 6~15 只,年可产 6~9 胎。雌鼠性周期在同笼雌鼠密度过大时可延长甚至被抑制,在有雄鼠存在时可恢复甚至缩短,这种现象称为 whitten 反应。雌鼠还有产后发情的特点。 小鼠性活动可维持 1 年左右,作为种鼠使用时间一般为 6~8 个月。;(3).消化 小鼠的颌下腺仅能分泌一种类型的唾液—浆液性粘液。 小鼠食管衬以厚的角质化鳞状上皮,邻近食道的胃粘膜也是角化的,靠近幽门的区域为腺体区,无论胃内有无食物,胃腺都持续分泌。 (4).营养、水代谢 小鼠对蛋白质的要求较高,一般为饲料营养比例的 20 % 以上。对维生素 E 缺乏敏感,体内自身可合成维生素 C。 小鼠体表蒸发面与整个身体相比所占比例比其它动物大,水分在体内的周转期比其它哺乳动物快。 小鼠对环境温度的波动有明显反应,对寒冷的应答为不发抖性产热。没有汗腺,也不能加大喘气量,唾液分泌能力有限,不易散热,环境温度升高则体温也随着升高,而且体温调节不稳定。 (5).呼吸、心率与血压 小鼠代谢率高、耗氧量大,在静止状态下,每小时每克体重约耗氧 3.5 mL。为了适应如此高的代谢率,小鼠具有高的肺泡氧分压、呼吸频率、红细胞总数、血红蛋白浓度、碳酸脱氢酶浓度、血氧浓度及血糖浓度等。;(6).泌尿 小鼠每次排尿仅 1~2 滴,且是高度浓缩的,小鼠能将尿浓缩到 4300 mOsm/L,而人类最大限度为 1160 mOsm/L。 小鼠正常情况下,其尿液中含有大量的蛋白质,还常排出氨基乙磺酸(牛胆碱 Taurine)和肌氨酸酐,禁食小鼠的肌氨酸酐与肌氨酸的比率为 1:1.4,排出的尿囊素比尿酸多,但没有色氨酸。 (7). 血液学指标 小鼠的血液量约占其体重的 1/5,易发生贫血。幼年小鼠的红细胞略小于成年小鼠。 ; 小鼠齿式为:。 上下颌相同,各有 2 个门齿和 6 个臼齿,门齿终生不断生长,故需经常啃咬有一定硬度的食物等,以使磨损的门齿维持适当的长度,这是啮齿类动物的特性,需要经常磨牙,故在饲养过程中应注意。小鼠喜食香脆,有一定硬度的食物。; 肾脏位于背壁两侧,右肾稍高,肾脏呈赤褐色蚕豆状。 雌鼠生殖器官包括卵巢、输卵管、子宫、阴道、阴蒂腺及乳腺

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