人乳头瘤病毒分型基因检测显示HPV16阳性是什么意思？
人乳头瘤病毒分型基因检测显示HPV16阳...
病情描述（发病时间、主要症状、症状变化等）：人乳头瘤病毒分型基因检测显示HPV16阳性是什么意思？
医院出诊医生
擅长：生殖器疣，病毒疣，肛门疣，软下疳等疾病
擅长：病毒疣
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因不能面诊，医生的建议及药品推荐仅供参考
职称：医师&
专长：病毒疣、生殖器疣、肛门疣、阴疣等疾病的治疗
问题分析：您好!尖锐湿疣高发于一些性生活活跃的青年男女间，首次性交低于19岁，性伴侣越多的人，患尖锐湿疣的概率就越高。所以想要避免它的复发，就需要保证洁净的性生活，在治疗期间要严禁性生活，避免造成再次感染。意见建议：您好!尖锐湿疣的预防复发可以从杜绝不洁的性行为、禁食烟酒、积极采取避免措施、积极治疗其他的传染性疾病、注意个人卫生、多加锻炼，增强自身体抗力等方面着手预防。
哈尔滨嵩山医院
职称：医师&
专长：擅长病毒疣、生殖器疣、肛门疣、阴疣等疾病的治疗
问题分析：人乳头瘤病毒16型。HPV有多种类型，其中低危型HPV感染，主要引起生殖器疣 （俗称菜花），而高危型HPV感染则引起生殖器癌和子宫颈癌上皮细胞病变，此病毒为生殖器癌和子宫颈癌前细胞病毒的开端。HPV16属于高危型，HPV病 毒会导致尖锐湿疣，长期感染可能与女性宫颈癌的发生有关。意见建议：感染了病毒就应该去选择好正确的方法进行诊疗，找到可以清除病毒的方法才将有机会帮助到患者达到理想的好结果。而目前已经有方法可以达到把病毒和疣体清除的效果，但是患者要慎重选择才行。
职称：医师&
专长：病毒疣、生殖器疣、等各种疑难病毒疣的诊疗，积累了深...
问题分析：您好，尖锐湿疣的病原体人乳头瘤病毒(HPV)，是一种非常细小的DNA病毒，一般当人们感染这种病毒后，病毒都会潜伏在基底角朊细胞间，当表皮细胞层复制时，再侵入细胞核，同时引起细胞的迅速分裂。意见建议：尖锐湿疣的病变表现在疣体，但是真正的原因是体内潜藏的病毒，所以有效的治疗应该从病毒的清除入手，传统治疗尖锐湿疣的方法虽然很多，但是仅仅对表面疣体治疗有用，并不能清除体内病毒。在传统技术逐步被淘汰的同时，新技术的诞生让尖锐湿疣患者有了更多的选择，已经可以实现一周内清除病毒的效果。
成都华西皮肤病研究院
职称：医师&
专长：男女性生殖器疣、男女性病毒疣及各类病毒疣疾病等。
问题分析：尖锐湿疣患者损害大小及形状不等，可仅为数个，亦可为多数针头样大的损害，在阴肛部可长成大的肿瘤样物，有压迫感;冠状沟痒，有恶臭味;有时小的湿疣可出现阴部痛痒不适，病人可出现尿血和排尿困难;直肠内尖锐湿疣可发生疼痛、便血，而直肠内大的湿疣则可引起里急后重感。意见建议：尖锐湿疣并不是难以启齿的疾病，建议你根据您自身的病情来治疗，同时要禁止性生活。它的发生多是因为直接发生不洁性接触或者是因个人生活习惯不卫生所致，由于很多人对于该病并不是太了解，以致在病情发展到严重程度才进行就医，这样的话就会导致误诊情况的发生。尖锐湿疣治疗需要结合很多因素考虑，慎重选择。
南京华肤医院
职称：医师&
专长：病毒疣、生殖疣、宫颈疣、肛门疣、阴道疣等方面
问题分析：尖锐湿疣常与其它几种疾病混乱，患者在治疗前可以先确认是不是尖锐湿疣，可以自己醋酸白检查，也可以去医院检查。尖锐湿疣会逐渐加重，呈现出菜花状、乳头状、鸡冠状等。意见建议：尖锐湿疣的出现最容易在尿道口部位，因为尿道口是很多疣状赘生物出现的地方，其主要的因素就是因为一些病毒感染了，导致尿道的上皮组织受到破坏
沈阳皇姑国防医院
职称：医师&
专长：病毒疣、 生殖疣、宫颈疣、 肛门疣、阴道疣等方面的...
问题分析：尖锐湿疣治疗要注意及时，同时药物用量要足够的，有必要要借助多种治疗方法和治疗手段。做好治疗期间的护理保健工作，注意清洁卫生，远离不洁性交，对生活接触物品要消毒，膳食结构均匀，多休息，确保良好的心情，避免远离各种不良情绪。意见建议：鉴于尖锐湿疣疾病特点，要注意膳食均匀，同时摄入营养物资和适当科学运动提升身体的免疫力。杜绝不洁性生活，远离经污染的内裤、浴盆、浴巾、便盆感染的物质。作息时间规律，避免各种生活陋习对身体免疫力的造成的影响。
成都华西皮肤病研究院
职称：医师&
专长：病毒疣、生殖器疣、等各种疑难病毒疣的诊疗
问题分析：尖锐湿疣方法如何选择尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒感染所致的以肛门生殖器部位增生性损害为主要表现的性传播疾病。要及时去医院就诊，查明引起原因，好对症下，并且尖锐湿疹注意是通过性传播的，好和准配偶，共同检查。意见建议：导致尖锐湿疣的主要的原因是夫妻间性生活不卫生，自身免疫力低下也是诱发尖锐湿疣的主要原因之一，所以不仅要用对，还要提高自身免疫力，通过饮食调整、身体锻炼等。
职称：医师
专长：皮肤病、皮肤美容、性病、中医
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问题分析： 你说的是宫颈检查吗？HPV是人乳头瘤病毒，感染后会得尖锐湿疣的，你没有症状属于隐性感染。意见建议：测HPV分型的意义在于确定你感染的HPV是属于低危的还是高危的，
因为HPV感染和女性宫颈癌关系密切，16属于高危型，说明你以后发生宫颈癌的几率比较高。
所以你还是积极治疗。
职称：医师
专长：脂肪瘤，痔疮，疝气，阑尾炎等，
&&已帮助用户：331897
指导意见：你好，尖锐湿疣患者在治疗期间应禁止性生活；尤其是在疣体未完全消退时应禁止性交，尖锐湿疣扩散或传染给他(她)人，以免反复难愈和并发它症或者癌变的发生，若经治疗,尖锐湿疣损害消退后月余,尖锐湿疣无复发且无新发损害者性交时应使用避孕套预防传染,并控制性生活频度。
职称：医生会员
专长：腰椎间盘突出,股骨头坏死,腱鞘炎,韧带拉伤
&&已帮助用户：108861
指导意见：您好，HPV是人乳头瘤病毒，主要引起皮肤粘膜鳞状上皮的疣状增生，您描述的主要是它的各型别，不同的型别引起不同的临床表现。建议您可以到医院检查结合临床症状针对性的做出治疗。
职称：药士
专长：前列腺炎,肾小球肾炎,手足口病,狂躁症,神经性头痛...
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指导意见：HPV属于人类乳头瘤病毒感染目前没有特效药物治疗可能会终生潜伏在机体内待到机体抵抗力下降发病长出尖 锐湿疣、宫颈 扁平疣等而且高危HPV感染跟宫颈癌发病关系密切,建议你主要是加强锻炼营养饮食增强机体抵抗 力定期宫颈检查防止宫颈恶变.
职称：护士
专长：妇产科
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指导意见：你好！乳头瘤病毒分型基因检测显示HPV16阳性就是你感染这组病毒中的16号病毒。目前拟宫颈还是炎症改变，积极治疗多能治愈的。可以利普刀治疗，结合干扰素抗的治疗
专长：顽固生殖器疣、病毒疣等各种疑难病毒疣的诊疗
问题分析：您好，hpv感染最常见的一种疾病就是尖锐湿疣!正常人体内是没有hpv病毒的，而一旦经检测发现hpv为阳性，表示您感染了hpv病毒。因而对于HPV为阳性的患者来说，应该要引起注意了!在发现自己患有尖锐湿疣疾病后，一定要立刻抓紧时间积极去治疗！意见建议：尖锐湿疣的传统疗法很多，如药物、激光、冷冻等，但这些治疗方法只能祛除表面疣体，并不能真正清除皮肤深处的湿疣病毒，一旦有诱因出现，尖锐湿疣就可能复发，因此让患者苦不堪言。目前有种方法通过提升患者自身免疫力，实现清除抑制病毒复制，促使病情的恢复。
专长：病毒疣、 生殖疣、宫颈疣、 肛门疣、阴道疣等方面的...
问题分析：而龟头尖锐湿疣的症状如果位于湿度较低干燥部位的生殖器疣，损害常小而呈扁平疣状。位于湿热湿润部位的疣常表现为丝状或乳头瘤状，易融合成大的团块。
　　专家还说，尖锐湿疣和生殖器疱疹一样也是一种常见的性传播疾病，尖锐湿疣主要是由人类乳头瘤病毒所引起。很多人因对尖锐湿疣的症状不了解而延误了疾病的最佳治疗时期。所以，了解龟头尖锐湿疣的症状是十分重要的。意见建议：母婴传播：主要来源于母系携带病毒，在进行妊娠时将病毒传染于婴儿，经由产道，感染该病毒，形成先天性的感染。剖腹产的婴儿感染的几率相对低。建议您这边可以去公立医院做一个全方面检查以及治疗。
专长：病毒疣、生殖器疣、等各种疑难病毒疣的诊疗，积累了深...
问题分析：你好，尖锐湿疣是一种性传播疾病，具有一定的感染型，可以通过性传播，母婴传播，也可能接触传播，当患者在接触有HPV病原体的物体，如内裤、毛巾等个人卫生用品；浴池、浴缸等公共卫生用品等，会造成接触传染。尖锐湿疣的损害初起为细小淡红色丘疹，以后逐渐增大增多，单个或群集分布，湿润柔软，表面凹凸不平，呈乳头样、鸡冠状或菜花样突起，红色或污灰色。意见建议：当你的身体出现了类似的症状后，建议早到医院确诊就医，避免错过最佳治疗时间，导致病情进一步恶化。通过根据hpv病毒分型、疣体大小、病毒数量等选择不同治疗方法。
专长：病毒疣、 生殖疣、宫颈疣、 肛门疣、阴道疣等方面的...
问题分析：男性感染尖锐湿疣后，其主要的发病部位是包皮系带、冠状沟、包皮、尿道、阴茎、肛门周围和阴囊。病初为淡红或污红色粟状大小赘生物，性质柔软，顶端稍尖，逐渐长大或增多。可发展成乳头状或囊状，基底稍宽或有带，表面有颗粒。在肛门部常增大，状如菜花，表面湿润或有出血，在颗粒间常积存有脓液，散发恶臭气味，搔抓后可继发感染。位于湿度较低干燥部位的生殖器疣，损害常小而呈扁平疣状。意见建议：患者要知道选择对症的方法，并循序接受治疗，这样是可以达到比较理想的效果的。与此同时需要患者注意的是，在病情好转之后，切不可大意，做好平时生活护理，才能摆脱该病困扰。
专长：男女性生殖器疣、男女性病毒疣、宫颈疣、阴道疣等
问题分析：尖锐湿疣在早期，会出现锥状小肉粒小丘疹，一般发生在外生殖器、肛周，多数是粉红色、菜花状，其表面很脆，用手很容易弄掉，同时也是很容易出血及感染。皮肤表面出现米粒大小的疣体，会随时间增长，可达到直径10多公分，而且生长迅速，有的会像菜花大小。意见建议：及时治疗才能避免病情反复，对有性传染性疾病接触史者，同时可看性病专科医生，进行有关的检查，以便能早期发现、早期诊断、早期治疗。
专长：病毒疣、 生殖疣、宫颈疣、 肛门疣、阴道疣等方面的...
问题分析：尖锐湿疣在初期会出现锥状小肉粒小丘疹，一般发生在外生殖器、肛周，多数是粉红色、菜花状，其表面很脆，用手很容易弄掉，同时也是很容易出血及感染。尖锐湿疣表现明显会出现皮肤表面出现米粒大小的疣体，会随时间增长，可达到直径10多公分，而且生长迅速，有的会像菜花大小。意见建议：尖锐湿疣患者应注意饮食需要改变，以增强免疫力，避免常常感染霉菌，要注意膳食结构调整，应少吃淀粉类、糖类以及刺激性的食物如酒、辣椒等，多吃蔬菜水果类，水分要充足。除饮食外，还要注意作息时间，多休息，避免压力，熬夜，不良情绪等各种陋习和行为。
专长：病毒疣、 生殖疣、宫颈疣、 肛门疣、阴道疣等方面的...
问题分析：尖锐湿疣在初期会出现锥状小肉粒小丘疹，一般发生在外生殖器、肛周，多数是粉红色、菜花状，其表面很脆，用手很容易弄掉，同时也是很容易出血及感染。尖锐湿疣表现明显会出现皮肤表面出现米粒大小的疣体，会随时间增长，可达到直径10多公分，而且生长迅速，有的会像菜花大小。意见建议：根据病因患者应该多摄取含蛋白质高的食物，诸如豆腐、米、面、玉米、花生、鸡肉等，但不是所有含蛋白质的食物都是可以吃的，像狗肉、羊肉等食物对患者的是没有好处的。
专长：病毒疣、生殖疣、宫颈疣、肛门疣、阴道疣等方面的诊疗
问题分析：尖锐湿疣的症状有很多，在发病初期会出现细小的淡红色的丘疹。随着时间的推移逐渐增大，而且数目也变多，皮肤表面有隆起的症状，大多数的皮丘质地比较脆而且比较坚硬，高低不平。意见建议：早发现早。有过与患病者接触的人，要随时注意外生殖器有无病变发生，一旦发现患上，一定要及时前往正规医院，进行相关诊治，避免错过时期。
问人乳头瘤病毒(HPV)高危HPV16阳性...严重吗Tct检查是非...
职称：医师
专长：全科医生
&&已帮助用户：27904
问题分析：患者青年女性人乳头瘤病毒高危HPV16阳性；Tct检查是非典型鳞状上皮细胞不能除外上皮内高度蹭(ASC-H).意见建议：你好非常理解你的心情请不要过度担心“人乳头瘤病毒(HPV)高危HPV16“和宫颈癌的发生有密切关系“Tct检查是非典型鳞状上皮细胞不能除外上皮内高度蹭(ASC-H)“这说明你很有可能是癌前蹭阶段但不要担心这个阶段是可以完全治愈的根据你的情况你不但需要做阴道镜最好能在阴道镜小取宫颈活检病理明确一些诊断病理诊断才是金标准希望你尽快到正规医院治疗祝早日康复
问人乳头瘤病毒分型基因检测显示HPV16阳性
职称：医师
专长：妇科
&&已帮助用户：27391
你好！这种情况你才做了手术，目前不必手术，可以上药和口服药物治疗，比如转移因子和阿昔洛韦。
问人乳头瘤病毒(HPV)DNA基因分型检测结果;16阳性(+)66阳性(+)这是什么病
职称：医师
专长：中医科,尤其擅长体寒等疾病
&&已帮助用户：32303
问题分析：下午好！检测人乳头瘤病毒HPV呈阳性，多易出现如尖锐湿疣、扁平疣等皮肤病症。本病多由不洁的性行为所感染。意见建议：因此对本病的治疗，多要与性伙伴同治才能更好地巩固疗效和防止复发。对初期的单个疣体，可用0.5%鬼臼毒素或0.15%鬼臼毒素霜，局部治疗。祝好！
问人乳头瘤病毒dna基因分型检测阳性HPV16是什么意思怎么...
职称：医生会员
专长：脑发育不全，高血压，糖尿病，心血管
&&已帮助用户：53167
问题分析：尖锐湿疣是由于人体感染人乳头瘤病毒后引起的性传播疾病，常好发于外生殖器和肛门口，发病后需积极的治疗，一般需采用激光或冷冻的方法去除疣体，目前来说没有尖锐湿疣疫苗的。意见建议：现在需采用抗病毒的药物积极的治疗，常用的有阿昔洛韦片、抗病毒颗粒等，还可以采用中医辨证，用清热解毒、凉血散结的方法有一定效果的。
问人乳头瘤病毒(HPV)高危HPV16阳性...严重吗Tct检查是非...
职称：医师
专长：全科医生
&&已帮助用户：27904
问题分析：患者青年女性人乳头瘤病毒高危HPV16阳性；Tct检查是非典型鳞状上皮细胞不能除外上皮内高度蹭(ASC-H).意见建议：你好非常理解你的心情请不要过度担心“人乳头瘤病毒(HPV)高危HPV16“和宫颈癌的发生有密切关系“Tct检查是非典型鳞状上皮细胞不能除外上皮内高度蹭(ASC-H)“这说明你很有可能是癌前蹭阶段但不要担心这个阶段是可以完全治愈的根据你的情况你不但需要做阴道镜最好能在阴道镜小取宫颈活检病理明确一些诊断病理诊断才是金标准希望你尽快到正规医院治疗祝早日康复
问你好请问人乳头瘤病毒基因分型检测报告HPV42为阳性HPV...
职称：医师
专长：皮肤
&&已帮助用户：90720
指导意见：HPV感染目前尚无特效药物。治疗主要是提高机体的免疫力，抵抗力。也就是用增加局部抵抗力为主要目的。干扰素就是这一类药物 ，可以使用。
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评价成功！在医院做的人乳头瘤病毒（HPV）基因分型检测报告，检测结果显示：低危型：HPV81,为阳性和高危型：HPV16,为
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提问时间： 17:33:48|
基本信息：
病情描述：
在医院做的人瘤病毒（HPV）基因分型检测报告，检测结果显示：低危型：HPV81,为阳性和高危型：HPV16,为阳性。是什么意思啊
补充问题：
HPV81和HPV16分别什么意思
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检查人乳头瘤病毒感染，81,十六亚型阳性。是由感染的，可能性较大，如果伴有尖锐赘生物，可以考虑手术治疗。如果伴有阴道炎症，或者宫颈炎症，一定要积极治疗。平时注意休息和饮食，有利于身体健康
那检测结果是被感染了？还是什么意思
是被感染了。需要积极治疗
被感染的严重吗？
是的，有感染是需要治疗的，以免造成尖锐湿疣表现。赘生物比较多，治疗就比较麻烦
检测内容低危型hpv6和hpv81有什么区别呢
人乳头瘤病毒感染以后，很多亚型的，16,81是其中的两个亚型。
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高危型比较容易导致宫颈癌，低危型将来可能导致癌前病变或尖锐湿疣这一类病变。至于是不是发病与个人抵抗力有关。
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外阴白斑组织中人乳头瘤病毒的快速检测与基因分型
□ 沈柱 崔大祥
摘　要:目的：为探讨人乳头瘤病毒（HPV）与外阴白斑发生的关系，应用通用引物聚合酶链式反应和反向点探针杂交方法对58例外阴白斑进行HPV6，11，16，18，31，33等型别进行快速检测及基因分型。方法：将上述6个病毒型别的特异性寡核苷酸探针依次固定在尼龙膜上，再与经通用引物PCR扩增的DNA靶序列杂交，即可在同一张膜上分辨出6型HPVDNA的任一型或几型。结果：
在我们检测的58例外阴白斑患者中，总阳性检出率为37．9％（22／58），其中，HPV6型7例（31．8％）、HPV11型5例（22．7％）、HPV6／11型（混合型）2例（9．1％）、HPV16型10例（45．5％）、HPV18型1例（4．5％）、HPV31型0例、HPV33型1例（4．5％）。经统计学分析，外阴白斑的发生与患者感染HPV有显著相关性（P＜0．01）。结论：良性型HPV（HPV6，11，6／11）与恶性型HPV（HPV16，18，33）可能均与外阴白斑的发生有关。
【关键词】& 乳头状瘤病毒
　　关键词: 乳头状瘤病毒，人;反向点探针杂交;外阴白斑;基因型
　　中图号:r739.5&
　　摘 要:目的& 为探讨人乳头瘤病毒（hpv）与外阴白斑发生的关系，应用通用引物聚合酶链式反应和反向点探针杂交方法对58例外阴白斑进行hpv6，11，16，18，31，33等型别进行快速检测及基因分型. 方法& 将上述6个病毒型别的特异性寡核苷酸探针依次固定在尼龙膜上，再与经通用引物pcr扩增的dna靶序列杂交，即可在同一张膜上分辨出6型hpv dna的任一型或几型. 结果& 在我们检测的58例外阴白斑患者中，总阳性检出率为37.9%（22/58）.其中，hpv6型7例（31.8%）、hpv11型5例（22.7%）、hpv6/11型（混合型）2例（9.1%）、hpv16型10例（45.5%）、hpv18型1例（4.5%）、hpv31型0例、hpv33型1例（4.5%）.经统计学分析，外阴白斑的发生与患者感染hpv有显著相关性（p<0.01）. 结论& 良性型hpv（hpv6，11，6/11）与恶性型hpv（hpv16，18，33）可能均与外阴白斑的发生有关.
　　rapid detection and genotyping of human papillo┐mavirus in patients with vulvar leukoplakia
　　shen zhu，yu chun-yan，cui da-xiang
　　department of dermatology，tangdu hospital，xi'an710038，china，institute of genetic diagno-sis of chinese pla，fourth military medical uni-versity，xi'an710033，china
　　keywords:papillomavirus，reverse hybridizatgenotype
　　abstract:aim to establish the correlation between the in-fection of human papillomavirus and occurrence of vulvar leukoplakia.methods a reverse hybridization blot probe assay was used.six sequence-specific oligonucleotides of hpv dna（types6，11，16，18，31and33）were used as specific probes and were fixed separately on a strip of nylon mem-brane，which could be used to hybridize with the pcr-ampli-fied target dna-sequence，so that we could detect and identi-fy any one of the6types of hpv on the same strip.paraffin sections of58patients with vulvar leukoplakia were tested for the presence of hpv by this assay and a general-primer based pcr.results 22out of58（37.9%）specimens tested were positive for hpv dna by pcr，of which7were posi-tive for hpv6（31.8%），5for hpv11（22.7%），2for hpv6/11（mixed type）（9.1%），10for hpv16（45.5%），1for hpv18（4.5%），0for hpv31，1for hpv33（4.5%）.statistical analysis revealed that there was marked correlation between the pathogeny of vulvar leukoplakia and hpvs（p<0.01）.conclusion infection of human papillomavirus may play a role in the occurrence of vulvar leukoplakia.we have identified both the benign and the malignant type hpvs in the vulvar leukoplakias.&&&& 　　引言
　　外阴白斑多见于中年以上妇女，好发于阴蒂、小阴唇和大阴唇内侧，损害为大小、数目、形态不一的肥厚性斑片或斑块，自觉症状常为瘙痒.关于外阴白斑是否为一种癌前病变，目前尚存在不同观点［1］ .其病因到目前为止，也尚不完全清楚，近年来国内外有报道其发生可能与人乳头瘤病毒感染有关［2，3］ .人乳头瘤病毒（human papilloma virus，hpv）广泛感染人类皮肤、生殖道、呼吸道等上皮组织，已被证实与多种良、恶性肿瘤（如尖锐湿疣、外阴癌、阴茎癌、宫颈癌、肺癌等［4］ ）的发生有关.其中hpv-6，11型与90%以上尖锐湿疣的发生有关，宫颈癌的发生以hpv-16，18等高危型的比重为高［5］ .因此快速、准确地检测hpv及区分型别，对于生殖区癌前病变及肿瘤的早期发现、预防及愈后监测是十分重要的.
　　近年来，由于核酸杂交技术的应用，分离出来的hpv型别已超过100型.由于hpv有这样大的异质性，所以传统的用于hpv基因分型的方法如使用hpv型特异性探针于原位杂交、点印迹杂交、south-ern印迹法、滤膜原位杂交，型特异引物扩增hpv序列，杂交（dna-rna）捕捉法等均需要将hpv常见的基因型逐个筛选，才能最后确定感染的hpv型别.而本研究所采用的改良的反向核酸杂交技术可以克服以上方法的不足，我们利用此技术对58例外阴白斑进行了hpv的检测以及基因分型.
　　1 材料和方法
　　1.1 标本来源
　　收集西安医科大学附属一院病理科、陕西省妇幼保健医院病理科、西京医院皮肤科、唐都医院皮肤科的石蜡包埋的外阴白斑组织标本共58例，其中增生型34例，萎缩型15例，混合型9例;尖锐湿疣标本20例;外阴鳞癌标本22例;发生在躯干部位的硬化萎缩性苔藓19例.
　　1.2 主要试剂
　　hpv16原型阳性质粒由山东医科大学分子生物学实验室于修平教授馈赠，hpv6，11，18，31，33原型阳性质粒由德国癌症研究中心e.-m.de villiers教授提供;hpv通用引物及β-globin引物序列pc03/gh20由上海sangon生物技术有限公司合成（tab1）;生物素化通用引物以及hpv6，11，16，18，31，33型特异性探针由北京赛百胜生物公司合成（tab2）;taq dna酶、dntps均系大连takara生物技术公司产品;反向杂交用膜为美国pall biosup-port公司的biodynr c尼龙膜;辣根过氧化物酶标记的抗生物素及dab显色系统购自华美生物公司;回收胶试剂盒购自上海华舜生物公司.
　　表1 pcr反应通用引物及对照反应引物序列(略)　　tab1 sequences of the applied primers sets of pcr
　　1.3 hpv dna提取
　　将10μm厚石蜡切片3张，裱于载玻片上常规烤片，二甲苯脱蜡后，切片自然干燥，用无菌刀片将组织刮入ep管中，加入消化裂解液200μl及终浓度为200mg.l-1 的蛋白酶k，置37℃水浴过夜.次日煮沸灭活蛋白酶k，11000g离心10min.酚-氯仿抽提后，10μl上清液直接用作pcr模板.
　　表2 6条针对于6型hpv dna的特异性探针序列(略)　　tab2 6sequence specific oligonucleotide probes against6types of hpv dna&&&& 　　1.4 pcr扩增及再扩增&
　　按照pcr标准反应条件，β-globin阳性的标本提取液（共58份）用于my09/11的扩增.40μl pcr反应体系（1×pcr buffer，1.5mmol?l-1 mgcl2 ，dntps各200μmol?l-1 ，my09/11引物各0.5μmol?l-1 ，taq dna聚合酶2.5u，补足灭菌去离子水）中加入上述10μl hpv dna提取液.反应条件为:94℃预变性3min，94℃变性1min，55℃退火1min，72℃延伸2min，最后72℃再延伸3min，共35个循环.
　　按照pcr反应设置对照组的原则，以原型hpv16重组质粒dna为阳性对照，来检测pcr反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论设计;阴性对照中:①选用正常人组织dna代替模板dna来作为标本（阴性）对照;②以灭菌去离子水代替模板dna作为空白（试剂）对照.取10μl pcr产物，进行15g?l-1 琼脂糖电泳，检测扩增产物片段的大小.
　　将阳性电泳条带按照回收试剂盒说明书的步骤进行回收，然后取1μl回收产物作为新的模板，以生物素化引物（5'bio-my09/11）作为新的引物，反应参数更改为:94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸50s，其他扩增条件不变，进行扩增生物素化的pcr产物，15g?l-1 琼脂糖电泳分析检测.
　　1.5 杂交膜的制备及反向杂交分析
　　将已合成的6种探针通过碳二亚胺的介导，固定在尼龙膜条上，膜的最上端为生物素化无关的dna是作为阳性对照.将条带置于80℃烤箱中过夜，使探针完全固定在膜上，4℃封存.
　　膜条与预杂交液混合过夜.生物素化的pcr产物100℃变性10min，然后立即置于冰水混合物中5min，再与膜条过夜完成杂交.次日取出膜条洗涤后，加入辣根过氧化物酶标记的抗生物素（avidin-hrp），最后进行dab显色（fig1）.
　　统计学处理:结果用χ2 检验进行统计学分析.
　　图1 反向点探针杂交分析示意图(略)　　fig1 sketch map for reverse hybridization blot probe assay
　　2 结果
　　2.1 琼脂糖凝胶电泳分析
　　将阳性质粒和石蜡标本的pcr扩增产物在15g?l-1 琼脂糖凝胶上电泳，可见这些产物的片段长度与预计的450bp基本相符（tab3，fig2）.
　　表3 通用引物pcr扩增产物片段的大小以及起始和终止的碱基位置(略)　　tab3 size of gp-pcr products and the initiation and termi-nation position in the respective whole sequences& hpv types&&& 　　图2 外阴白色病变组织hpv dna的通用引物pcr扩增结果(略)　　fig2 agarose gel analysis of the gp-pcr products of hpv dnas from vulvar leukoplakia samples&&&& 　　2.2 反向点探针杂交法分析结果
　　标本经pcr扩增后，实验组总阳性率为37.9%（22/58），进行反向杂交分析，部分结果见fig3.在实验组标本中，增生性营养不良（hyperplastic dystrophy）阳性率为35.3%（12/34）、萎缩性营养不良（lichen sclerosus et atrophicus of vulva）为40.0%（6/15）、混合性营养不良（mixed dystrophy）为44.4%（4/9）;对照组中，发生在躯干的硬化萎缩性苔藓（lichen sclerosus et at-rophicus）阳性率为5.3%（1/19）、尖锐湿疣（condylo-ma acuminatum）为90%（18/20）、外阴鳞癌（scc of vulva）ⅰ级为50%（5/10），ⅱ级为40%（2/5），ⅲ级为28.6%（2/7）（tab4）.
　　图3 pcr-反向点探针杂交法分析hpv阳性外阴白斑患者感染的病毒类型(略) ......(未完，请点击下方“在线阅读”)
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